[发明专利]分离自健康山核桃林地的生防类芽孢杆菌及其用途

说明书

本发明公开了一种分离自健康山核桃林地土壤的生防芽孢杆菌PHLA101，为Paenibacillus polymyxa PHLA101，保藏编号为CCTCC NO:M2019161。本发明还同时提供了上述生防芽孢杆菌PHLA101的用途：抑制烟草赤星病菌、山核桃干腐病菌、桑果菌核病菌的菌丝生长。

技术领域

本发明属于作物病害防控技术领域，尤其涉及一种分离自健康山核桃林地的生防类芽孢杆菌PHLA101及其在山核桃干腐病等病害防治中的应用。

背景技术

多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)是一种非病原性的细菌，经常分布在植物根围土壤等环境中发现，属于革兰氏阳性细菌，具有周鞭鞭毛，可以运动。多粘类芽孢杆菌过去是作为多粘芽孢杆菌(B.polymyxa)，属于芽孢杆菌属(Bacillius)的成员。后来基于16S rRNA基因序列的系统发育分析发现其与芽孢杆菌属存在显著的差异，于1993年划归类芽孢杆新属(Paenibacilluas)。多粘类芽孢杆菌的芽孢对辐射、热、干燥、pH值和有毒化学物等极端环境有很强的抵抗能力。据报道，在休眠状态下，多粘类芽孢杆菌的芽孢可以保持活力数年甚至数十年。且其芽孢有繁殖速度快、营养要求简单等特点，很适合作为生防资源予以开发。研究表明多粘类芽孢杆菌对植物病原菌的作用机制主要与脂肽化合物等次级代谢产物相关，而不同来源的株系对病原菌的抑菌谱经常不同，甚至对相同病原菌会显示不同的颉颃活性。例如M-1防治火疫病(Erwinia amylovora)和软腐病(E.carotovor)，IAM5可有效防治茄子青枯病(Ralstonia solanacearum)，近年来一些新的多粘类芽孢杆菌专利株系则登记用于灰霉病、稻瘟病等不同的真菌病害防治。如在已经报道的多粘类芽孢杆菌产生的众多的抗菌物质中，多粘菌素M由Paenibacillus kobensis产生，而多粘菌素F是由P.circulans产生。然而，不同多粘类芽孢杆菌株系产生的杀镰孢菌素是不同的。

山核桃(Carya cathayensis)为胡桃科(Juglandaceae)山核桃属落叶乔木，是中国特有的经济树种和干果，具有很高的营养价值和经济价值。我国现有山核桃栽培面积约1.3×10⁶hm²，年平均一产产值17.5亿元，加工产值34.2亿元。近年来，由葡萄座腔菌引起的山核桃干腐病，在安徽省、浙江省临安、淳安、桐庐等山核桃主栽培区普遍发生，并且不断蔓延，对山核桃的生长、产量及未来产业的可持续发展构成了严重威胁。据杭州市林水局2015年的专题调查：全市现有山核桃林约6.0万hm²，其中罹病面积达到惊人的3.9万hm²，占64％；而临安区为发病最严重的区域，发病率高达86.5％，干腐病造成的减产幅度达15％以上，年产量损失1400余吨，直接经济损失就达1.0244亿元以上，而间接损失更是难以估量。研究者认为山核桃干腐病发生的日益严重与林地土壤的退化可能有比较密切的关系。

部分现有的多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)的作用如下：

1、2019114048189的发明《一株多粘类芽孢杆菌及其应用》提供了一种多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)HY31，其保藏编号为CCTCC No:M20191102。对尖孢镰刀菌黄瓜专化型、尖镰孢菌番茄专化型、尖镰孢菌辣椒专化型和尖镰孢萎蔫专化型等植物枯萎病病原菌均有很强的抑制效果，可以预防枯萎病的发生同时促进蔬菜的生长。

2、2019112812633的发明《一种多粘类芽孢杆菌Lla-02及其应用》提供了一种多粘类芽孢杆菌Lla-02(Paenibacillus polymyxa)，保藏号CGMCC NO.18753；从百合鳞片中分离得到，其对尖孢镰刀菌、灰霉葡孢、百合枯萎病菌、葡萄座腔菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌均具有抑菌活性。

发明内容