[发明专利]一种提高胶乳免疫比浊法线性范围和稳定性的方法、试剂及试剂盒

权利要求书

1.一种提高胶乳免疫比浊法线性范围和稳定性的试剂盒，其特征在于，包括试剂R1和试剂R2，所述试剂R1包括以下成分：

2-(N-吗啡啉)乙磺酸缓冲液：0.1-0.2mol/L pH7.0；EDTA-2Na：0.5g/L；氯化钠：0.08mol/L；Brij-35：0.1%-0.5%；叠氮化钠：0.1%；

所述试剂R2通过以下方法制备:

制备原料溶液，包括：

溶液a.活化缓冲液：50 mmol/L HEPES缓冲液，PH值为6.0；

溶液b.偶联缓冲液：50 mmol/L HEPES缓冲液，PH值为7.4；

溶液c.活化剂：按照10mg/ml的浓度称量EDC，现配现用；

溶液d.封闭液1：200mM TRIS pH=8.0；

溶液e.封闭液2：10%BSA；

溶液f.R2缓冲液：50mmol/L HEPES，0.5g/L的EDTA-2Na，5%海藻糖，0.1%PC-300，pH值为7.4；

制备胶乳试剂，包括：

①取粒径为100nm-200nm的胶乳微球1mL与溶液a按体积比1:6进行混合后混匀；

②向步骤①中加入0.4mL的10mg/ml的溶液c，混匀，并置于恒温摇床中反应20min，温度：37℃；

③向步骤②中加入0.4mL的10mg/ml的溶液c，混匀，并置于恒温摇床中反应20min，温度：37℃；

④用溶液b把RBP抗体稀释至1mg/mL，向步骤③中加入5mL的1mg/ml稀释后的RBP抗体，混匀，并置于恒温摇床中反应2h，温度：37℃；

⑤向步骤④中加入2mL的溶液d，混匀，并置于恒温摇床中反应1h，温度：37℃；

⑥向步骤⑤中加入2mL的溶液e，混匀，并置于恒温摇床中反应1h，温度：37℃；

⑦反应完成后离心并去除上清液，转速为16000rpm，离心时间为40分钟；

⑧去除上清液，并用50mL溶液f复溶，重悬胶乳微球，重悬过程中使用细胞破碎仪辅助重悬。