[发明专利]一种检测非洲猪瘟病毒CD2v与MGF360黏膜抗体的试纸条及其应用

权利要求书

1.一种检测非洲猪瘟病毒CD2v与MGF360黏膜抗体的试纸条，其特征在于包括设有检测线和质控线的硝酸纤维素膜，所述检测线处包被有鼠抗猪SC蛋白单克隆抗体；所述质控线处包被有非洲猪瘟阳性血清的纯化蛋白；所述非洲猪瘟阳性血清是将重组蛋白CD2v和重组蛋白MGF360免疫兔子后所得。

2.根据权利要求1所述试纸条，其特征在于所述非洲猪瘟阳性血清的纯化蛋白是将非洲猪瘟阳性血清采用protein G纯化试剂盒纯化后所得蛋白；所述鼠抗猪SC蛋白单克隆抗体是由分泌抗猪SC蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株4H11所制备，所述杂交瘤细胞株4H11的保藏号为：CCTCC NO：C201526。

3.根据权利要求1或2所述的试纸条，其特征在于：所述试纸条还包括样品垫，所述样品垫是将玻璃纤维膜采用含有酪蛋白和Tween-20的PBS缓冲液浸泡处理后所得。

4.配合权利要求1-3之一所述试纸条使用的样本稀释液，其特征在于所述样本稀释液含有量子点微球标记的重组蛋白MGF360和量子点微球标记的重组蛋白CD2v；所述重组蛋白MGF360的序列如SEQ ID NO:4所示；所述重组蛋白CD2v的序列如SEQ ID NO:2所示。

5.根据权利要求4所述样本稀释液，其特征在于将量子点微球分别与重组蛋白MGF360和重组蛋白CD2v偶联，分别得到量子点微球标记的重组蛋白MGF360和量子点微球标记的重组蛋白CD2v；然后将量子点微球标记的重组蛋白MGF360和重组蛋白CD2v按照体积比为1：0.5-1.5混合，得到非洲猪瘟病毒双蛋白-标记物；将所述非洲猪瘟病毒双蛋白-标记物与含有酪蛋白和Tween-20的PBS缓冲液按照体积比1:10-20混合，得到样本稀释液。

6.根据权利要求5所述样本稀释液，其特征在于所述量子点微球与重组蛋白MGF360的质量比为3-5:1，所述量子点微球与重组蛋白CD2v的质量比为3-5:1；所述PBS缓冲液含有0.2-1.0%的酪蛋白和0.1-0.3%的Tween-20。

7.一种以非诊断为目的的采用权利要求1所述试纸条和权利要求4所述样本稀释液检测非洲猪瘟病毒黏膜抗体的方法：将拭子样品加入样本稀释液中孵育后，滴加在试纸条的样品垫，反应后，采用紫外光发射器检测C线和T线。

8.根据权利要求7所述方法，其特征在于所述拭子样品包括口拭子、鼻拭子、肛拭子和肺泡灌洗液。