[发明专利]一种湖羊精液常温保存最适温度的筛选方法

权利要求书

1.一种湖羊精液常温保存最适温度的筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1）、配制湖羊精液常温保存稀释液，所述配方由15.30～15.40gTris、7.7～8.7g柠檬酸、9.5～10.5g果糖、0.1～0.2g青霉素钠、0.3～0.4g链霉素硫酸盐溶解于500mL超纯水中构成；首先将15.30～15.40gTris、7.7～8.7g柠檬酸、9.5～10.5g果糖充分溶解于500mL超纯水中，然后使用0.22µm滤膜过滤除菌，在4℃冰箱保存，最后添加0.1～0.2g青霉素钠、0.3～0.4g链霉素硫酸盐，得到湖羊精液常温保存稀释液；

步骤2）、采集精液，混合采集到的精液消，消除个体差异，然后将精液稀释10倍；将130µl的精液加入1.5ml的离心管中，沿着离心管管壁缓慢加入37℃预热的稀释液，用棉花包裹3～4层，放置在15℃、20℃、25℃不同温度下进行保存，每隔8小时轻轻摇晃保存精液的离心管，防止精子沉降；

步骤3）、湖羊精液在15℃、20℃和25℃不同温度的保存过程中，采用精子自动分析仪以及试剂盒对不同保存温度条件下的湖羊精液保存期间的活率、活力、死亡率、存活时间、运动性能以及活性氧含量各项指标进行检测，完成湖羊精液常温保存最适温度的筛选。

2.根据权利要求1所述的一种湖羊精液常温保存最适温度的筛选方法，其特征在于，所述Tris、柠檬酸、果糖、青霉素钠、链霉素硫酸盐分别为15.35g、8.25g、10g、0.1559g、0.3472g。

3.根据权利要求1所述的一种湖羊精液常温保存最适温度的筛选方法，其特征在于，步骤3）中，湖羊精液常温保存最适温度的筛选后，湖羊精液常温保存的最适温度为15℃。