[发明专利]一种黑磷促进精氨酸快速释放NO的方法

说明书

本发明公开一种黑磷促进精氨酸快速释放NO的方法，取4‑二甲氨基吡啶、含胍基化合物和黑磷反应；分离得到保护的黑磷BP‑含胍基化合物；取1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺(EDC)、N‑羟基琥珀酰亚胺(NHS)和葡萄糖氧化酶(GOx)在PB中反应；加入BP‑含胍基化合物，离心得到GOx和BP‑含胍基化合物偶联物BP‑含胍基化合物‑GOx；将BP‑含胍基化合物‑GOx溶解于葡萄糖溶液中，用近红外光照射黑磷，产生过氧化氢(H₂O₂)，H₂O₂氧化含胍基化合物快速产生NO。用黑磷光热效应，促进葡萄糖氧化酶产生过氧化氢、精氨酸氧化快速产生NO。产品稳定性好，酶活高，NO释放快速，产量高。

技术领域

本发明涉及二维材料制备方法，特别涉及一种黑磷促进精氨酸快速释放NO的方法。

背景技术

一氧化氮(nitric oxide，NO)是生物体内一种重要的生物信号分子和效应分子，是由NO合酶(NOS)催化精氨酸产生，生物体内各组织中起到各种生理作用如扩张血管，抗肿瘤等，但受限于内源性NO的产生量，往往难以满足机体应对病变的需要，所以外源性NO供体已被开发作为其主要来源。NO供体类型主要分为有机硝酸酯、S-亚硝基硫醇、硝普盐、呋咱N-氧化物、偶氮鎓二醇盐等。这些小分子NO供体在疾病治疗中已经有广泛的应用，但也存在半衰期短，特异性差，代谢产物毒副作用大等缺点。这些都在不同程度上阻碍了其在生物医药领域的应用，因此，为了弥补外源性NO供体带来的不足，对于内源性NO的开发极为重要。

精氨酸在体内是一种重要的氨基酸，精氨酸不仅可以在NOS的作用下产生NO，在H₂O₂作用下，精氨酸也能被氧化产生NO。A.R.Ray等(Journal of Molecular Catalysis A：Chemical，2007：207-214.)设计一种简单易行的负载铁(III)卟啉催化剂，用铁(III)卟啉模拟一氧化氮合酶的作用来催化L-Arg与H2O2的仿生氧化产生NO。Fan等(Angew.Chem.Int.Ed.2016(55)：1-6.)设计一种新型的葡萄糖反应体系(L-Arg-HMON-GOx)，利用中空介孔有机二氧化硅纳米粒子(HMON)作为载体，在葡萄糖氧化酶(GOx)的作用下将其转化为葡萄糖酸和H₂O₂，H₂O₂进一步氧化L-精氨酸产生NO。

精氨酸作为NO供体已被用于各种抗菌及抗肿瘤治疗中，但该过程存在释放缓慢且释放量少等缺陷，因此亟需一种有效策略来弥补现存不足。黑磷(BP)由于其紫外到近红外光的宽吸收，近红外消光系数大和光热转换效率高等特点，可以作为良好的光热试剂。

发明内容

发明目的：本发明目的是提供加速H₂O₂与Arg反应快速产生大量NO的方法。

技术方案：本发明提供一种黑磷促进精氨酸快速释放NO的方法，包括如下步骤：

(1)取4-二甲氨基吡啶(DMAP)、含胍基化合物和黑磷，常温下在有机溶剂和水的混合液中反应；

(2)上述反应完成后，去除未反应的含胍基化合物；

(3)将反应后的分散液离心分离得到保护的黑磷(BP-含胍基化合物)；

(4)取1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(EDC)、N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)和葡萄糖氧化酶(GOx)，在PB中常温反应；

(5)将BP-含胍基化合物加入上步反应中，反应后离心得到GOx和BP-含胍基化合物偶联物(BP-含胍基化合物-GOx)；