[发明专利]一种酵母培养物与复合乳酸菌制剂及其制备方法

说明书

本发明公开了一种酵母培养物，由酿酒酵母菌和产朊假丝酵母通过液态发酵培养后接种固态发酵，经过干燥与粉碎包装后制备得到。还公开一种复合乳酸菌制剂由酵母培养物做载体与植物乳杆菌、凝结芽孢杆菌与鼠李糖乳杆菌复配制备得到，且这3株乳酸菌菌粉原料都经过菌体包被保护处理。本发明能减少或替代抗生素使用的，不仅能抑制动物肠道病原菌生长繁殖，从而减少或预防细菌性疾病的发生，还能促进对饲料的营养物质消化吸收，提高饲料利用率，促进采食，增强免疫力能，从而促进动物生长、提高生产性能。

技术领域

本发明涉及微生物发酵技术及乳酸菌制剂的技术领域，尤其涉及一种酵母菌固态发酵的产物，以及利用此产物做载体复配乳酸菌来制备益生菌制剂的方法。

背景技术

一般养殖动物的细菌性疾病的预防或治疗，多数采用化学制剂类、抗生素类药物，该类药物不仅对环境造成一定的污染，还可能导致药物残留与造成病原微生物产生耐药性。在养殖行业中，随着抗生素、化学杀菌剂的普遍使用，已经逐渐地带来一系列的弊端，如病菌耐药性产生、药物残留、破坏肠道正常菌群、破坏环境等。根据农业农村部第194号公告通知，2020年全面禁抗：饲料端“禁抗”，养殖端“减抗、限抗”，最终目的是要解决抗生素在环境污染、健康安全、耐药性超强细菌等负面。所以养殖行业必将朝着减抗替抗的趋势发展，而益生菌制剂则可作为替抗的其中一种。

酵母固态发酵培养物为酵母菌通过特定的工艺与培养，进行充分固态发酵而形成的。酵母固态发酵培养物不仅含有酵母细胞代谢产物，如多肽、有机酸、寡糖及其酶类等物质，而且还富含酵母菌菌体。酵母菌菌体破壁后的细胞内容物及酵母细胞壁富含维生素、氨基酸、核苷酸、矿物质以及β-葡聚糖、甘露聚糖等。有研究表明这些营养物质能改善养殖动物的肠胃内环境促进营养物质消化吸收，促进采食，增强免疫力能，从而促进动物生长、提高生产性能。

一般能够发酵糖类物质代谢产生乳酸的，且无芽孢，为革兰氏阳性细菌的统称为乳酸菌。乳酸菌作为常见的益生菌的一种，可通过代谢产生有机酸、酶类及其细菌素等生物活性物质，来抑制病原菌的繁殖与定植。从而改善养殖动物肠道菌群平衡，预防细菌性疾病的方法，其中植物乳杆菌与鼠李糖乳杆菌皆具有良好的抑菌效果。

目前国内大多数的研究资料表明，复配的益生菌制剂的载体多数采用米糠、沸石粉、硅藻土与麦饭石等。这些载体无法提供对动物机体的有效成分，且卫生指标多数不合格。而本发明则采用酵母菌发酵料作为载体，不仅能提供营养物质，而且保证了产品卫生质量问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种能减少或替代抗生素使用的复合乳酸菌制剂，该制剂能有效改善动物机体肠道健康，减少或预防腹泻等健康疾病的发生，且该制剂无残留、无毒害，是绿色的、安全的新型饲料添加剂。具体地本发明提供一种酵母菌固态发酵制备酵母培养物的方法，及其酵母培养物作为载体与乳酸菌复配成复合乳酸菌制剂的方法。

本发明所述酵母培养物由酿酒酵母菌和产朊假丝酵母通过液态发酵培养后接种固态发酵，经过干燥与粉碎包装后制备得到。所述复合乳酸菌制剂由酵母培养物做载体与植物乳杆菌、凝结芽孢杆菌与鼠李糖乳杆菌复配制备得到，且这3株乳酸菌菌粉原料都经过菌体包被保护处理。

本发明所述酵母培养物的制备方法步骤是：

(1)原菌种活化：将酿酒酵母菌和产朊假丝酵母菌接种到已灭菌的YPD斜面培养基中好氧培养直至长出菌落，得到各自活化斜面菌种；YPD斜面培养基含有葡萄糖20g、蛋白胨20g、酵母膏10g、氯霉素0.1g、琼脂粉20g和蒸馏水1L，pH自然；

(2)一级种子液的制备：将由步骤(1)得到的酿酒酵母菌和产朊假丝酵母斜面菌种接种到已灭菌的液体YPD培养基中，于30-33℃好氧培养24-36h，得到酵母菌原菌液；液体YPD培养基含有葡萄糖20g、蛋白胨20g、酵母膏10g、氯霉素0.1g、蒸馏水1L，pH自然；