[发明专利]ORM2基因及蛋白在作为肿瘤治疗靶点中的应用

说明书

本发明公开了ORM2基因及蛋白在作为肿瘤治疗靶点中的应用。本发明提供了降低ORM2蛋白含量或者抑制ORM2基因表达的物质在制备具有如下1)和/或2)所示功能产品中的应用：1)抑制肿瘤转移；2)治疗肿瘤。本发明使用iTRAQ蛋白质定量技术初步筛选出ORM2蛋白为目标蛋白，在基因转录水平和蛋白表达水平同时证明了在四氯化碳和奥沙利铂治疗后小鼠肝脏中ORM2表达显著增高。小鼠动物模型中，将ORM2蛋白在小鼠肝脏过度表达后可显著增加小鼠肝脏和肺脏转移肿瘤的数量；肝脏特异性敲降ORM2的小鼠，肝脏转移肿瘤的数量明显减少。

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种ORM2(Orosomucoid-2，Alpha-1-AcidGlycoprotein 2，类粘蛋白2)基因及蛋白在作为肿瘤治疗靶点及肿瘤转移临床辅助诊断中的应用，尤其涉及ORM2基因及蛋白在作为肿瘤治疗靶点中的应用。

背景技术

肿瘤转移是患者死亡的主要原因，化疗药物尽管在体外杀死肿瘤细胞非常有效，但临床研究发现化疗药物与肿瘤转移密切相关。部分研究表明，化学药物可能诱发肿瘤细胞发生改变，从而加剧肿瘤细胞增殖和扩散。因此，值得关注的不仅是化学药物引起的恶心和脱发等副作用，化疗促进肿瘤生长和转移的副作用更应引发人们深思。对化疗与肿瘤转移的相关机制进行研究，期待保留化疗药物治疗疗效的同时降低转移发生概率。

用于肝转移研究的动物模型，通常使用两种方法：(1)在脾脏包膜下注射肿瘤细胞(脾脏注射法)；(2)盲肠浆膜下移植肿瘤细胞(盲肠法)。1959年，勒杜克率先成功使用脾脏注射肿瘤在小鼠肝脏中引起肿瘤的形成。脾脏注射法是常用的方法且优势显著，因为肿瘤细胞注射技术相对容易，形成的肿瘤结节不影响动物的存活，产生肝转移效果稳定，就算在小鼠中也可以使用，被广泛使用在研究肝脏转移的动物模型中。

在盲肠法中，肿瘤经过在盲肠浆膜下移植，是一种可以模拟自然条件下产生的原位移植模型。盲肠法的最大缺点是盲肠中的肿瘤细胞植入操作复杂，时间长，大约需要5周，它会导致肝转移，肺和弥漫性腹膜转移，产生肝转移效果不够稳定并且难以处理大鼠模型，用于研究肝脏微转移时不够理想因为很难判断实验观察时间。

此外，在肝脏组织上直接注射肿瘤细胞，由于无法模仿结直肠癌的血源性扩散的公认假设，操作难度极大已经很少使用。直接在门静脉系统中注射肿瘤细胞模拟血管扩散并也因为可以在其他地方发生肿瘤的风险及操作难度不如脾脏注射方便也很少被使用。

尾静脉注射建立肺癌实验性转移模型。这种方法通常将肿瘤细胞悬液直接注射血管腔内建立的模型，这种方法的优点缩短了靶向器官内形成瘤灶的时间，转移率高。缺点是该模型模拟了肿瘤复杂转移过程的一个阶段，并不能模拟转移的全过程。与皮下注射肿瘤细胞相比，转移率高且出现转移的时间明显缩短。与原位移植相比，小鼠不容出现感染，且存活时间长有利于后续的研究。因此，该模型特点是操作简单、出现远处转移的时间短、转移效率高、动物存活率高及存活时间长。