[发明专利]一种靶向AXL的CAR-T细胞及其制备方法和应用在审
| 申请号： | 202010813351.X | 申请日： | 2020-08-13 |
| 公开（公告）号： | CN114075548A | 公开（公告）日： | 2022-02-22 |
| 发明（设计）人： | 张振峰;曹碧辉;刘曼婷;杨丽丽;陈德基;练辉;周玉波;彭韧;李俊平;冯云飞;王露;陈小佩;田宇;吴镜强;刘敏;刘玲 | 申请（专利权）人： | 广州医科大学附属第二医院 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N15/867;A61K39/00;A61P35/00 |
| 代理公司： | 广州润禾知识产权代理事务所(普通合伙) 44446 | 代理人： | 林伟斌 |
| 地址： | 510000 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 靶向 axl car 细胞 及其 制备 方法 应用 | ||
1.靶向AXL的CAR-T细胞在制备治疗表达AXL的肺癌的产品的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述肺癌为对EGFR-TKI耐药肺癌。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，CAR-T细胞携带下调AXL表达的蛋白序列和/或蛋白。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述肺癌为非小细胞肺癌。
5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，产品包括EGFR-TKI药物。
6.根据权利要求1～5任一项所述的应用，其特征在于，所述靶向AXL的CAR-T细胞scFV蛋白选自3E3E8、20G7D9或YW327.6S2中的一种或多种。
7.一种制备靶向AXL的CAR-T细胞制备方法，其特征在于，包括步骤：
S1、构建含有CAR分子序列的慢病毒载体，所述CAR分子序列包括AXL scFv序列、铰链区-Hinge序列、跨膜区序列、共刺激结构域序列、CD3ζ序列，所述AXL scFv序列表达靶向AXL的scFv蛋白；
S2、对步骤S1获得的慢病毒载体进行慢病毒包装，获得包含慢病毒载体的慢病毒；
S3、对人的外周血单个核细胞PBMCs进行分离，从分离后的PBMCs分选出T细胞并对T细胞进行刺激；
S4、使用步骤S2中获得的慢病毒感染步骤S3刺激后的T细胞，获得靶向AXL的CAR-T细胞。
8.根据权利要求7所述的一种靶向AXL的CAR-T细胞制备方法，其特征在于，所述靶向AXL的scFv序列为表达3E3E8、YW327.6S2或20G7D9蛋白的基因序列。
9.根据权利要求7所述的一种靶向AXL的CAR-T细胞制备方法，其特征在于，所述铰链区-Hinge为CD8 hinge，跨膜区为CD28跨膜区，共刺激结构域包括CD28和/或4-1BB共刺激结构域。
10.一种根据权利要求7-9任一项所述的靶向AXL的CAR-T细胞制备方法获得的CAR-T细胞。
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