[发明专利]一种家蚕血液型脓病的智能检测系统及方法

权利要求书

1.一种家蚕血液型脓病的智能检测方法，其特征在于，所述家蚕血液型脓病的智能检测方法包括：

步骤一，剪去蚕的尾角或腹足，制作血液样本，对蚕的尾角或腹足进行研磨，滴入相应的溶液，再进行精细研磨检测样品；

步骤二，将制作完成的检测样品放置在专门的温度调节保温箱内部，分成3份，一份作为检测样品，另两份作为备用样品；

步骤三，利用电子显微镜获取检测样品的样品图像，并对所获取的检测样品图像进行处理；

步骤四，将一份备用样品加入少量磷酸缓冲液过滤，滤液使用差速离心法反复离心至乳白色，收集沉淀，用少量的PBS悬浮静置；

步骤五，溶于适量TE中，加入等体积碱解液，37℃碱解4h；10％HAc调pH值至7～8；加SDS和蛋白酶K至终浓度分别为0.5％100μg/mL，37℃水浴3h；

步骤六，加1/10体积的3mol/L醋酸钠溶液；加3倍体的冰乙醇沉淀DNA，漂洗、风干后的基因组DNA溶于TE，贮存备用；

步骤七，在不同浓度的反应组分和不同反应时间条件下，在实时浊度仪中进行LAMP反应，每隔6s测定1次浊度值，根据浊度值绘制浊度变化曲线，当浊度值大于0.25即可判为阳性；

步骤八，根据家蚕血液型脓病试验获取的图像样本对检测样品图像进行识别，对检测输出的样品结果进行输出，若检测血液样本出现六角形，大小均匀，折光性较强，则判定为家蚕血液型脓病；

步骤九，通过利用扬声器，用以对结果和实验操作过程，进行提示播音；通过显示器，显示出检测过程中有关的数据；

步骤十，通过数据储存模块对图像进行分类存储，并通过信号传输模块与云服务器连接，实现数据的传输、下载和共享。

2.如权利要求1所述的家蚕血液型脓病的智能检测方法，其特征在于，步骤一中，精细研磨采用的具体方法为：

将粗磨完成的家蚕血液型脓病检测样品放置在研磨槽中，将研磨棒垂直放置；

手持中间位置，顺时针研磨三圈，逆时针研磨三圈，不断重复操作；

在研磨过程中，不断对研磨的检测样品进行观察。

3.如权利要求1所述的家蚕血液型脓病的智能检测方法，其特征在于，步骤三中，对所获取的检测样品图像进行处理的具体过程为：

获取相应的样品图像检测去噪训练样本，确定样品图像中的圆形邻域；

计算圆形邻域样品图像的灰度值，并对灰度值进行排序，取其中间值作为中心像素灰度的新值；

通过圆形邻域对整体图像进行平滑处理。

4.如权利要求1所述的家蚕血液型脓病的智能检测方法，其特征在于，步骤六中，冰乙醇沉淀DNA时为-20℃沉淀，过夜；然后利用预冷的75％乙醇漂洗2次，风干后的基因组DNA溶于TE，-20℃贮存备用。

5.如权利要求1所述的家蚕血液型脓病的智能检测方法，其特征在于，步骤七中，不同浓度的反应组分为2～12mmol/L MgSO4、0.2～1.2mol/L Betaine和0.6～1.6mmol/LdNTPs；

不同反应时间为20min、40min、60min和80min。

6.如权利要求1所述的家蚕血液型脓病的智能检测方法，其特征在于，所述数据储存模块对图像进行分类存储的方法为：

根据获取的家蚕血液型脓病检测样品图像，提取相应的特征；

构建K-NN算法模型中邻元素作为家蚕血液型脓病检测样品图像解析参数，读取每个图像的特征，并将放入数组；

读取每一图像中的特征，对图像进行分类，对图像进行类别标签和图像序号。

7.如权利要求6所述的家蚕血液型脓病的智能检测方法，其特征在于，所述根据获取的家蚕血液型脓病检测样品图像，提取相应的特征，所采用的图像特征提取过程为：

确定家蚕血液型脓病检测样品图像中的检测区域，计算检测区域中的像素；

根据像素的数据，对像素进行排序，选取中间像素，并对周围的像素进行替换；

计算检测区域中的直方图，对该直方图进行归一化处理；

将得到的每个cell的统计直方图进行连接成为一个特征向量，整幅图的LBP纹理特征向量。