[发明专利]青蒿素改善玫瑰痤疮炎症用动物和细胞模型的构建方法

说明书

本发明公开了青蒿素改善玫瑰痤疮炎症用动物和细胞模型的构建方法，涉及皮肤性疾病药剂技术领域，具体为青蒿素改善玫瑰痤疮炎症用动物和细胞模型的构建方法，包括以下步骤：(1)青蒿素改善玫瑰痤疮炎症表型的动物模型构建；(2)青蒿素改善玫瑰痤疮炎症表型的细胞模型构建。本发明的优点在于发现了一种治疗玫瑰痤疮潜在新药(青蒿素)，并且对玫瑰痤疮的发病机制进行了探索，本发明发现青蒿素能明显改善LL37诱导的玫瑰痤疮样炎症小鼠皮损红斑、组织病理学改变及IL‑1β、IL‑6、TNFα、TLR2的升高，同时，青蒿素可减少皮损CD4+T细胞、巨噬细胞和中性粒细胞浸润，抑制皮损中免疫细胞相关趋化因子(CXCL10、CCL20、CCL2和CXCL2)的表达。

技术领域

本发明涉及皮肤性疾病药剂技术领域，具体为青蒿素改善玫瑰痤疮炎症用动物和细胞模型的构建方法。

背景技术

玫瑰痤疮是一种慢性面部皮肤炎症性疾病，主要表现为面部隆突部位反复发作的阵发潮红、持久性红斑、毛细血管扩张、丘疹脓疱、鼻部肥大增生等症状。玫瑰痤疮主要发生在浅肤色人种中，流行病学调查显示在不同国家玫瑰痤疮的患病率从2％到22％不等。目前玫瑰痤疮的详细发病机制尚未完全阐明，但许多因素包括紫外线、饮食、热刺激、微生物及应激状态等都被认为可诱发或加重玫瑰痤疮。虽然玫瑰痤疮并不威胁患者的生命，但是由于皮损位于面部并且往往合并反复的灼热、刺痛、瘙痒等症状，所以其对患者心理、正常社交及生活都照成明显的影响，流行病调学查也显示玫瑰痤疮患者生活质量出现明显降低。虽然玫瑰痤疮具体的病理生理机制尚不清楚，但积累的研究证据显示除了遗传因素，面部皮肤局部免疫过度激活及神经血管功能失调是玫瑰痤疮重要发病机制。

虽然玫瑰痤疮的病理生理学机制尚未完全阐明，但是目前的证据表明玫瑰痤疮多年来一直是免疫、血管和神经功能障碍的原因。在玫瑰痤疮中固有免疫和适应性免疫均明显激活，特别是Toll样受体2(TLR2)和抗菌肽(CAmp) 在局部皮肤表达升高，并且皮损中中性粒细胞、巨噬细胞、CD4T细胞均有明显浸润；另外患者皮损中血管扩张和增殖，特别是在鼻赘型患者中最为明显。同时，基因组和qPCR结果显示血管内皮生长因子(VEGF)和神经源性炎症基因 (TRP)，香草醛受体1(TRPV1)在玫瑰痤疮中升高。因此，美国FDA批准的玫瑰痤疮临床药物包括多西环素和α-肾上腺素受体激动剂，这些药剂的临床功效归因于它们的抗炎或抗血管生成特性。

青蒿素(Artemisinin，ART)是从青蒿中分离出来的一种抗疟药物。目前青蒿素已治愈超过一百万的疟疾患者并且未显示出明显的副作用和不良反应。除了抗疟，因具有免疫调节作用青蒿素也用于免疫性疾病如系统性红斑狼疮，同时临床和基础研究也发现青蒿素具有抗炎和抗血管生成的作用。在上述研究中，青蒿素被用于治疗红斑狼疮、关节炎等自身免疫性疾病和肿瘤性疾病。另外，玫瑰痤疮的基础研究也证实面部皮内炎症激活如固有免疫中的中性粒细胞、巨噬细胞和肥大细胞，适应性免疫中的CD4+T细胞等均呈明显浸润，而面部毛细血管扩张和增殖更是玫瑰痤疮特征性的病理改变，在病人中导致明显的红斑表型。所以基于已有的研究发现，我们推测青蒿素对玫瑰痤疮具有良好的治疗作用。

由于青蒿素对玫瑰痤疮治疗效果尚不清楚，需要构建玫瑰痤疮小鼠模型进行药物干预明确青蒿素对玫瑰痤疮炎症表型和病理改变的影响，青蒿素虽然具有抗炎和抗血管增殖的作用，但是如何在玫瑰痤疮中发挥这些作用，具体的机制也尚不清楚，所以，需要通过各种技术手段在细胞层面来检测细胞相关的蛋白质、细胞因子，之后再研究这些分子的作用机制，靶细胞等，由于是一个逆向研究的过程，因此早期需要花费大量的人力物力进行大筛选工作的缺点。

发明内容