[发明专利]一种从含海藻糖和麦芽糖的混合物中分离纯化海藻糖的方法

权利要求书

1.一种从含海藻糖和麦芽糖的混合物中分离纯化海藻糖的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)、色谱分离：将海藻糖和麦芽糖混合液在30～70℃条件下，注入装填专用色谱介质的色谱柱，以水作洗脱剂洗脱，分别收集洗脱液和残留液；色谱柱的温度为30～70℃，柱径高比为1:1～1:7，进料流量为10～40ml/min，洗脱流速为20～50ml/min，料水比l:3；海藻糖和麦芽糖混合液进料质量浓度为10％-60％；收集的所述洗脱液中海藻糖含量大于98％及麦芽糖含量小于2％，所述残留液中麦芽糖含量大于98％及海藻糖含量小于2％；

2)麦芽糖转葡萄糖：往步骤1)得到的残留液和洗脱液中加入麦芽糖酶及EDTA、Fe³⁺或K⁺中的一种或几种，控制转化温度为90～110℃，PH为5.0～8.0，将残留液及洗脱液中的麦芽糖转化成葡萄糖分别得到第一残留液和第一洗脱液；

3)葡萄糖转葡萄糖酸：利用Au/C为催化剂，催化所述第一残留液和第一洗脱液中的葡萄糖生成葡萄糖酸，再通过色谱方法或适用于糖酸分离的其他分离手段将葡萄糖酸与海藻糖分离开来，分别得到海藻糖一和葡萄糖酸一、海藻糖二和葡萄糖二，所述海藻糖一和海藻糖一中海藻糖含量均大于99％，所述葡萄糖酸一和葡萄糖酸二中葡萄糖酸含量均大于99％；

4)、混合：将海藻糖一和海藻糖二混合得到海藻糖液，将葡萄糖酸一和葡萄糖酸二混合得到葡萄糖酸液；

其中步骤1)中色谱柱内装填的专用色谱介质为强酸型阳离子树脂或钙型阳离子树脂或镁型阳离子树脂或钠型阳离子树脂或钾型阳离子树脂或胺型阳离子树脂。

2.如权利要求1所述的从含海藻糖和麦芽糖的混合物中分离纯化海藻糖的方法，其特征在于，步骤3)中的色谱方法包括离子交换柱色谱或结合模拟移动床的更高效的色谱分离方法。

3.如权利要求1所述的从含海藻糖和麦芽糖的混合物中分离纯化海藻糖的方法，其特征在于，还包括将海藻糖液和葡萄糖酸液进行结晶。

4.如权利要求3所述的从含海藻糖和麦芽糖的混合物中分离纯化海藻糖的方法，其特征在于，将海藻糖液进行结晶具体操作为：浓缩60-80％，进行蒸发结晶或冷却结晶，结晶后离心分离，干燥；向干燥后得到的海藻糖晶体中依次加入水和无水乙醇，溶解后进行重结晶，得到结晶海藻糖产品，所述结晶海藻糖其海藻糖纯度≥99.5％。

5.如权利要求3所述的从含海藻糖和麦芽糖的混合物中分离纯化海藻糖的方法，其特征在于，将葡萄糖酸液进行结晶具体操作为：将麦芽糖酸液加入醇类溶剂，降温至10～20℃析晶2～5小时；将结晶料液离心，离心所得固体，在60～70℃下烘干，得到结晶葡萄糖酸产品，所述醇类溶剂为甲醇、乙醇或异丙醇中的一种。

6.如权利要求5所述的从含海藻糖和麦芽糖的混合物中分离纯化海藻糖的方法，其特征在于，所述醇类溶剂质量分数为90～100％，体积为麦芽糖酸液体积的0.5～1.5倍。

7.如权利要求5所述的从含海藻糖和麦芽糖的混合物中分离纯化海藻糖的方法，其特征在于，所述醇类溶剂为异丙醇。

8.如权利要求1所述的从含海藻糖和麦芽糖的混合物中分离纯化海藻糖的方法，其特征在于，所述步骤3)利用Au/C为催化剂，催化所述第一残留液和第一洗脱液中的葡萄糖生成葡萄糖酸后还包括将催化转化后的第一残留液和第一洗脱液用滤膜过滤除去催化剂，滤液中再加入活性炭脱色，后使用滤膜过滤。