[发明专利]一种辅助鉴定待测大豆的白粉病抗性的分子标记RMD16

权利要求书

1.一种特异引物对，其特征在于：由用于扩增特异DNA片段的两条引物组成；所述的引物序列如SEQ ID NO.1～2所示。

2.一种试剂盒，其特征在于：含有权利要求1所述的特异引物对。

3.权利要求1所述的特异引物对和/或权利要求2所述的试剂盒的应用，其特征在于，为如下b1)-b3)中的任意一种：

b1)辅助鉴定待测大豆的大豆白粉病抗性；

b2)辅助筛选具有或疑似具有大豆白粉病抗性的大豆品种；

b3)辅助筛选不具有或疑似不具有大豆白粉病抗性的大豆品种。

4.一种DNA片段，其特征在于：为以大豆基因组DNA为模板，利用权利要求1所述的特异引物对和/或权利要求2所述的试剂盒扩增得到。

5.根据权利要求4所述的DNA片段，其特征在于：所说的DNA片段的核苷酸序列如SEQ IDNO.3或SEQ ID NO.4所示。

6.权利要求4或5所述的DNA片段的应用，其特征在于，为如下c1)-c7)中的任意一种：

c1)辅助鉴定待测大豆的大豆白粉病抗性；

c2)辅助筛选具有或疑似具有大豆白粉病抗性的大豆品种；

c3)辅助筛选不具有或疑似不具有大豆白粉病抗性的大豆品种；

c4)制备辅助鉴定待测大豆的白粉病抗性的产品；

c5)制备辅助筛选具有或疑似具有大豆白粉病抗性的大豆品种的产品；

c6)制备辅助筛选不具有或疑似不具有大豆白粉病抗性的大豆品种的产品；

c7)作为辅助筛选不具有或疑似不具有大豆白粉病抗性的大豆品种的分子标记。

7.一种辅助鉴定待测大豆白粉病抗性的方法，其特征在于，为通过如下任一种或两种方法实现：

S1、根据PCR扩增产物进行辅助鉴定：

d1)提取待测大豆的基因组DNA，然后以待测大豆的基因组DNA为模板，采用权利要求1所述的特异引物对和/或权利要求2所述的试剂盒进行PCR扩增，得到PCR扩增产物；

d2)根据PCR扩增产物的大小判断大豆白粉病抗性：若PCR扩增产物为103bp的DNA片段，说明待测大豆具有或疑似具有大豆白粉病抗性；若PCR扩增产物为100bp的DNA片段，说明待测大豆不具有或疑似不具有大豆白粉病抗性；

S2、根据待测大豆的基因组DNA进行辅助鉴定：

e1)提取待测大豆的基因组DNA，然后检测待测大豆的基因组DNA中是否含有如SEQ IDNO.3或SEQ ID NO.4所示的DNA序列；

e2)根据DNA序列判断大豆白粉病抗性：如果待测大豆基因组中含有SEQ ID NO.3，则待测大豆具有或疑似具有大豆白粉病抗性；如果待测大豆基因组中含有SEQ ID NO.4，则待测大豆不具有或疑似不具有大豆白粉病抗性。

8.根据权利要求7所述的辅助鉴定待测大豆白粉病抗性的方法，其特征在于：

步骤d1)中所述的PCR扩增的体系为10ul反应体系：10～15ng大豆基因组DNA、10ng引物F、10ng引物R、5ul GenStar 2×Taq PCR StarMix，余量为ddH₂O；

步骤d1)中所述的PCR扩增的条件为：94℃3min；94℃30s，55℃30s，72℃30s，30个循环；72℃5min。