[发明专利]一种拮抗西甜瓜果斑病的菌株及其应用

权利要求书

1.一种伯克霍尔德氏菌N01(Burkholderiasp.N01)，其特征在于，保藏编号为CCTCCNO：M2020248。

2.一种生防菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将质量体积比1～10％的如权利要求1所述的伯克霍尔德氏菌N01、液体培养基、钙、镁、磷混合进行液体摇瓶发酵，25～35℃培养，转速120～220rpm，得种子液，其中所述伯克霍尔德氏菌N01菌数达10⁸cfu/g；

(2)扩大培养：原料为重量百分比1％～5％的麸皮、重量百分比0～3％的菜饼、重量百分比0～3％的豆饼粉、钙、镁、磷，加水量为99～89％，搅拌混合，得混合液；115～120℃高压灭菌后，待混合液温度冷却至35℃以下时，再按质量体积比1～10％的接种量以无菌操作方式接种种子液，始终保持0.01MPa以上的正压环境，25～35℃通气培养24～96小时，至发酵菌数达10⁸cfu/ml以上即可，其中，步骤(1)、(2)中，钙终浓度均为0.9～1.5g/L，镁终浓度均为0.5～1.3g/L，磷终浓度均为0.8～2.5g/L；最后无菌包装成菌剂。

3.一种育苗基质和营养补充剂联用在防治西甜瓜果斑病中的应用，其特征在于，所述育苗基质含有权利要求1的伯克霍尔德氏菌株N01或权利要求2制备的生防菌剂。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述育苗基质的制备方法：将菇渣腐熟料、草炭、蛭石和珍珠岩分别按体积百分比为45：35：13：7均匀混合，按3kg/m³加入含有所述伯克霍尔德氏菌株N01的生防菌剂并混合均匀，再用自来水调节基质的含水率至30％～40％，使基质中含伯克霍尔德氏菌菌数达10⁷cfu/g以上即得到育苗基质。

5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述和营养补充剂联用：根据西甜瓜种植所选穴盘孔数，补充氮、磷和钾混合物，依次为下列方案任一：

若为32孔穴盘，所述氮、磷和钾混合物与所述育苗基质质量比为4.8～5.2g/kg，其中，氮：磷：钾质量比为2.1～2.3：3～3.2：4.1～4.3；

若为50孔穴盘，所述氮、磷和钾混合物与所述育苗基质质量比为5.8～6.2g/kg，其中，氮：磷：钾质量比为3.1～3.3：2.1～2.3：4.2～4.4；

若为60孔穴盘，所述氮、磷和钾混合物与所述育苗基质质量比为6.8～7.2g/kg，其中，氮：磷：钾质量比为2.4～2.6：3.2～3.4：4～4.2；

若为72孔穴盘，所述氮、磷和钾混合物与所述育苗基质质量比为7.8～8.2g/kg，其中，氮：磷：钾质量比为3～3.2：3.5～3.7：4.1～4.3，或者，所述氮、磷和钾混合物与所述育苗基质质量比为8.8～9.2g/kg，其中，氮：磷：钾质量比为2.8～3：3.4～3.6：6～6.2。

6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述和营养补充剂联用：根据西甜瓜种植所用穴盘孔数，补充氮、磷和钾混合物，依次为下列方案任一：

若为32孔穴盘，所述氮、磷和钾混合物与所述育苗基质质量比为5g/kg，其中，氮：磷：钾质量比为2.2：3.1：4.2；

若为50孔穴盘，所述氮、磷和钾混合物与所述育苗基质质量比为6g/kg，其中，氮：磷：钾质量比为3.2：2.2：4.3；

若为60孔穴盘，所述氮、磷和钾混合物与所述育苗基质质量比为7g/kg，其中，氮：磷：钾质量比为2.5：3.3：4.1；

若为72孔穴盘，所述氮、磷和钾混合物与所述育苗基质质量比为8g/kg，其中，氮：磷：钾质量比为3.1：3.6：4.2，或者，所述氮、磷和钾混合物与所述育苗基质质量比为9g/kg，其中，氮：磷：钾质量比为2.9：3.5：6.1。

7.如权利要求6所述的应用，其特征在于，补充磷、钾使用磷酸二氢钾，其中P含量≥52.0％，K含量≥34.0％；补充钾使用硫酸钾，其中K含量≥51.0％；补充氮使用尿素，其中N含量≥46.0％。