[发明专利]一种SARS-CoV-2病毒的单链抗体及用途

说明书

本发明公开了一种SARS‑CoV‑2病毒的单链抗体的序列结构，所述单链抗体与抗原S1‑RBD特异性结合。还公开了制备所述单链抗体的方法，在药学上、试剂盒、组合物中的应用。所述单链抗体的功能是与S1‑RBD结合，阻止S1‑RBD与细胞上受体ACE2结合可应用于中和抗体的开发。

技术领域

本发明总体涉及疫苗领域，更具体地，涉及一种SARS-CoV-2病毒的单链抗体及用途。

背景技术

冠状病毒属的病毒是具有外套膜包裹的RNA病毒，其直径约100-160nm，遗传物质在所有RNA病毒中最大。包裹病毒粒子的脂肪膜表面有三个糖蛋白：棘突糖蛋白(S，是受体结合位点、溶细胞作用和主要抗原位点)；小包膜糖蛋白(E，较小，与胞膜结合的蛋白)；膜糖蛋白(M，负责营养物质的跨膜运输、新生病毒出芽释放与病毒外包膜的形成)。

S蛋白被酶解为S1和S2，S1内有一部分区域为受体结合域(RBD)与 ACE2紧密结合，是病毒和受体相互作用的关键因素。

SARS-CoV-2属于一种新型冠状病毒，感染病毒的人会出现程度不同的症状，或是发烧或轻微咳嗽，或发展为肺炎，早期的百分比显示，该病毒致死率约为2％到4％。在SARS-CoV-2感染中，与SARS-CoV(主要感染纤毛支气管上皮细胞和II型肺细胞)感染相同，血管紧张素转化酶II(ACE2)被证明是细胞受体。SARS-CoV-2可以进入表达ACE2的细胞，但不能进入没有ACE2的细胞。因此，ACE2在SARS-CoV-2感染中起着至关重要的作用。

针对SARS-CoV-2病毒，需要提供特异性良好的抗体或者小分子抗体，便于检测和预防。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供了一种SARS-CoV-2病毒的单链抗体，所述单链抗体与抗原S1-RBD的SEQ NO：1序列特异性结合。

根据本发明的一个实施方式，所述的单链抗体，包括：重链的可变区的序列为SEQNO：2所示的氨基酸序列；轻链的可变区的序列为SEQ NO：3所示的氨基酸序列。

根据本发明的一个实施方式，重链的可变区的序列与SEQ NO：2所示的氨基酸序列具有95％相同。

根据本发明的一个实施方式，轻链的可变区的序列与SEQ NO：3所示的氨基酸序列95％相同。

根据本发明的一个实施方式，连接肽的序列为SEQ NO：4所示的序列。

根据本发明的一个实施方式，连接肽的序列与SEQ NO：4所示的序列 95％相同。

根据本发明的另一个方面，提供了一种制备SARS-CoV-2病毒的单链抗体的方法，包括，选取SARS-CoV-2抗原S-RBD，从全人源抗体文库中筛选得到单链抗体，所述单链抗体。

根据本发明的另一个方面，提供了一种试剂盒，所述试剂盒包括权利要求1-7中任一项所述的单链抗体。

根据本发明的另一个方面，提供了一种在药学上可接受的载体，其中包含上述任一方案所述的单链抗体。

根据本发明的另一个方面，提供了一种包含两种或多种上述任一方案所述的单链抗体的组合物，所述组合物与抗原S1-RBD的SEQ NO：1序列相结合。

本发明中的ScFv，靶向S1-RBD，阻止S1-RBD与ACE2的结合，可用于中和抗体的开发；而且，本发明的ScFv为全人源单抗，没有免疫原性反应。

附图说明

图1是阳性克隆显色在深孔板的示意图；

图2是表1中的阳性克隆的OD450数值折线图。

具体实施方式