[发明专利]一种特异去除砷的载体及其构建方法与应用

权利要求书

1.一种载体，其特征在于，包含金属或非金属结合蛋白表达盒，所述表达盒包含金属诱导启动子或非金属诱导启动子、细菌表面展示载体蛋白基因、金属结合蛋白基因或非金属结合蛋白基因；优选所述金属为镉、锌、铅、铜、镍，所述非金属为砷。

2.一种能够特异去除砷的载体，其特征在于，包含砷结合蛋白表达盒，所述表达盒包含砷诱导启动子、细菌表面展示载体蛋白基因和砷结合蛋白基因；所述砷结合蛋白为来源于大肠杆菌基因组或大肠杆菌R因子R773质粒、荧光假单胞菌MSP3的基因组、铜绿假单胞菌基因组的砷结合蛋白；

和/或，所述砷诱导启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.1或SEQ NO.2所示。

3.根据权利要求2所述的载体，其特征在于，所述砷诱导启动子的核苷酸序列如SEQ IDNO.1所示，所述砷结合蛋白基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；或者，

所述砷诱导启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述砷结合蛋白基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；或者，

所述砷诱导启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述砷结合蛋白基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。

4.根据权利要求1～3任一项所述的载体，其特征在于，所述细菌表面展示载体蛋白为选自冰核蛋白、Lpp-OmpA、OmpC中的一种；

优选为冰核蛋白N端结构域。

5.根据权利要求1～4任一项所述的载体，其特征在于，所述表达盒还包含荧光蛋白基因；

优选地，所述表达盒沿5’至3’方向依次包括砷诱导启动子、细菌表面展示载体蛋白基因、荧光蛋白基因和砷结合蛋白基因。

6.根据权利要求1～5任一项所述的载体，其特征在于，所述表达盒具有如SEQ ID NO.5～7任一所示的序列；

优选地，所述表达盒还包含位于砷结合蛋白基因下游的转录终止子。

7.根据权利要求1～6任一项所述的载体，其特征在于，所述载体为含有携带所述表达盒的pUC系列载体、pBR322系列载体、或pACYC系列载体。

8.权利要求1～7任一项所述的载体的构建方法，其特征在于，将所述表达盒连接入质粒载体中得到。

9.含有权利要求1～7任一项所述的载体的工程菌。

10.权利要求1～7任一项所述的载体或权利要求9所述的工程菌的在去除或回收金属或非金属元素中的应用，或在治理环境中金属或非金属元素污染中的应用。