[发明专利]VEGFR-2拮抗剂及其应用

说明书

本发明提供了一种新型VEGFR‑2拮抗剂。本发明的化合物，可在哺乳动物中抑制VEGF诱导型血管生成相关疾病，比如肿瘤或视网膜疾病，如早产儿视网膜病变。本发明通过多角度实验，证实了其活性及应用。

技术领域

本发明涉及医药领域。

背景技术

血管内皮生长因子(VEGF)家族包括VEGF-A等，VEGF-A可以激活表达在内皮细胞上的酪氨酸激酶受体血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2)，刺激血管内皮细胞增殖、促进新生血管形成，并进一步促进视网膜病变的发展。首次报道中显示，VEGFR-2是跨膜激酶受体，全长1356个氨基酸。

丹酚酸C(Salvianolic acid C)是种植物提取物，经检索，未见其在VEGF靶点的研究。

发明内容

本发明克服了现有技术的不足，通过大量筛选，得到了一种新型VEGFR-2拮抗剂。

本发明公开了丹酚酸C作为VEGFR-2拮抗剂的用途，或者在哺乳动物中抑制VEGF诱导型血管生成相关疾病，比如肿瘤或视网膜疾病，如早产儿视网膜病变。

所述拮抗剂是指，能与相应的受体VEGF结合，并能够与配体竞争性结合受体活性位点的一类物质的总称。

所述VEGF诱导型血管生成是指，由细胞因子VEGF诱导细胞形成新生血管。

附图说明

图1展示了对细胞增殖的影响，其中图1a为对ARPE-19细胞的，图1b为对HUVEC细胞的。

图2为划痕实验结果，其中图2a为对ARPE-19细胞的，图2b为对HUVEC细胞的。

图3为对细胞侵袭的影响。

图4为对管状形成的影响，其中图4a为对ARPE-19细胞的，图4b为对HUVEC细胞的。

具体实施方式

下面实验可能涉及的英文缩写：

续表

一、对候选小分子M-15(丹酚酸c)，研究内容与方法概述如下：

1.6.1候选小分子化合物的亲和力筛选

微量热涌动(MST)技术检测小分子化合物与VEGFR-2蛋白的亲和力，并以VEGF165蛋白作为阳性对照。

1.6.2候选小分子化合物的体外活性研究

(1)通过MTT实验技术检测M-15小分子化合物分别对HUVEC和ARPE-19细胞生长增殖的影响。

(2)利用划痕实验，测定M-15小分子化合物分别对HUVEC和ARPE-19细胞迁移的影响。

(3)利用Transwell实验，测定M-15小分子化合物对ARPE-19细胞侵袭的影响。

(4)利用管状形成实验，测定M-15小分子化合物分别对HUVEC和ARPE-19细胞成管能力的影响。

二、具体实验及结果如下：

2 VEGFR-2拮抗剂的亲和力筛选：

2.1部分主要试剂说明

Human VEGFR-2 Protein(His Tag)北京百普赛斯生物科技公司

Human VEGF165 Protein北京百普赛斯生物科技公司