[发明专利]一种大果红花油茶胚性愈伤组织的诱导方法在审
| 申请号： | 202010823217.8 | 申请日： | 2020-08-17 |
| 公开（公告）号： | CN111903525A | 公开（公告）日： | 2020-11-10 |
| 发明（设计）人： | 赵静珂;刁英 | 申请（专利权）人： | 重庆福林农业生物技术研究院有限公司 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 重庆飞思明珠专利代理事务所(普通合伙) 50228 | 代理人： | 刘念芝 |
| 地址： | 402100 重庆*** | 国省代码： | 重庆;50 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 红花 油茶 胚性愈伤 组织 诱导 方法 | ||
1.一种大果红花油茶胚性愈伤组织的诱导方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)外植体的选择与处理
选取当年新抽枝条上的嫩芽作为外植体，经消毒处理，切除旧伤口，待用；
2)胚性愈伤组织的诱导
将步骤1)经消毒处理后的外植体接种到诱导培养基中进行诱导培养，培养3-4周，得到胚性愈伤组织；
3)胚性愈伤组织的增殖培养
将步骤2)得到的胚性愈伤组织转移至增殖培养基中进行增殖培养，每3周继代一次，得到大量胚性组织。
2.根据权利要求1所述的大果红花油茶胚性愈伤组织的诱导方法，其特征在于，步骤1)所述消毒处理，将外植体用自来水冲洗30min，将外植体表层鳞片剥除，于无菌环境下用75％酒精预处理30s后，用无菌水漂洗3-4次，再用0.1％(w/v)氯化汞溶液消毒1min，无菌水再次漂洗3-4次后，用无菌滤纸吸干。
3.根据权利要求1所述的大果红花油茶胚性愈伤组织的诱导方法，其特征在于，步骤2)所述诱导培养基，为1/2MS培养基中添加2.0mg/L的6-BA、2.0mg/L的NAA、30g/L的蔗糖、3.0g/L的琼脂、2.0g/L的PVP，且调节pH为5.4。
4.根据权利要求3所述的大果红花油茶胚性愈伤组织的诱导方法，其特征在于，采用1MHCl溶液或1M NaOH溶液调节pH。
5.根据权利要求1所述的大果红花油茶胚性愈伤组织的诱导方法，其特征在于，步骤3)所述增殖培养基为1/2MS培养基中添加2.0mg/L的6-BA、2.0mg/L的NAA、30g/L的蔗糖、3.0g/L的琼脂、2.0g/L的PVP，且调节pH为5.4。
6.根据权利要求5所述的大果红花油茶胚性愈伤组织的诱导方法，其特征在于，采用1MHCl溶液或1M NaOH溶液调节pH为5.4。
7.根据权利要求1所述的大果红花油茶胚性愈伤组织的诱导方法，其特征在于，步骤2)所述诱导培养，培养温度为25±1℃，光照时间为12h/d，光照强度为1200lux。
8.根据权利要求1所述的大果红花油茶胚性愈伤组织的诱导方法，其特征在于，步骤3)所述增殖培养，培养条件为25±1℃，光照时间为12h/d，光照强度为1200lux。
9.根据权利要求3所述的大果红花油茶胚性愈伤组织的诱导方法，其特征在于，所述诱导培养基的制备过程为，每升纯水中加入2.215g MS培养基、2.0mg 6-BA、2.0mg NAA、30g蔗糖、3.0g琼脂、2.0g PVP，pH值用1M HCl溶液或1M NaOH溶液调节至5.4，置于灭菌锅于121℃灭菌15min。
10.根据权利要求1所述的大果红花油茶胚性愈伤组织的诱导方法，其特征在于，所述增殖培养基的制备过程为，每升纯水中加入2.215g MS培养基、2.0mg6-BA、2.0mg NAA、30g蔗糖、3.0g琼脂、2.0g PVP，pH值用1M HCl溶液或1M NaOH溶液调节至5.4，置于灭菌锅于121℃灭菌15min。
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