[发明专利]一种互隔交链孢霉素人工抗原在酶联免疫试剂盒中的应用有效
申请号: | 202010823404.6 | 申请日: | 2020-08-17 |
公开(公告)号: | CN112098641B | 公开(公告)日: | 2023-07-11 |
发明(设计)人: | 冯月君;王兆芹;万宇平;赵正苗;何方洋 | 申请(专利权)人: | 北京勤邦科技股份有限公司 |
主分类号: | G01N33/543 | 分类号: | G01N33/543;G01N33/53;G01N33/535;C07D311/80 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 互隔交链孢 霉素 人工 抗原 免疫 试剂盒 中的 应用 | ||
1.一种检测互隔交链孢霉素的酶联免疫试剂盒,其特征在于包括:包被有包被原的酶标板、互隔交链孢霉素标准品溶液、互隔交链孢霉素抗体、酶结合物浓缩液、酶结合物稀释液、底物显色液、终止液、洗涤液,所述包被原为互隔交链孢霉素偶联抗原,所述酶结合物为酶标记的互隔交链孢霉素抗体,所述互隔交链孢霉素抗体是由免疫原免疫动物得到的,所述互隔交链孢霉素偶联抗原是由互隔交链孢霉素半抗原与载体蛋白偶联得到,所述互隔交链孢霉素半抗原制备方法为:取互隔交链孢霉素30mg,加四氢呋喃50ml溶解,加三氟乙酸5ml,充分搅拌,加羟基乙酸0.7g,油浴加热,回流反应12h,停止反应,加水100ml,加乙酸乙酯100ml,充分震荡,静置分层,除去水相,有机相加水60ml洗涤,震荡静置,分去水相,有机相蒸干,体积比为1/9的二氯甲烷/正己烷1ml洗涤打浆,静置,分去上清液,所得沉淀干燥,得到羟乙酸化互隔交链孢霉素半抗原26mg,收率70%;
所述互隔交链孢霉素半抗原的分子结构式为:
2.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于所述免疫原的制备方法如下:
取羟乙酸化互隔交链孢霉素14mg,加1ml DMSO溶解,加NHS 9.7mg,DCC 19mg,充分溶解混匀,反应3h,得到半抗原活化液A液;取牛血清白蛋白BSA 50mg,加0.1M PB缓冲液溶解,得到B液,滴加全部的A液到B液中,室温反应4h,0.02M PBS透析纯化3天,每天换液3次,得到互隔交链孢霉素-BSA偶联物,即为免疫原,-20℃分装,保存,备用。
3.一种检测样品中互隔交链孢霉素含量的方法,包括步骤:
(1)样品前处理;
(2)用权利要求1~2任一项所述的试剂盒进行检测;
(3)分析检测结果。
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