[发明专利]HSA-Biotin-DDA-TCPP分子的合成及其作为光动力治疗剂及纳米药的应用

权利要求书

1.本发明Biotin-HSA-DDA-TCPP聚集体，由人血清白蛋白(Human serum albumin，HSA)，生物素(Biotin)，1，12-二氨基十二烷(简称DDA)与卟啉(Tetrakis(4-carboxyphenyl)porphyrin，TCPP)通过三步酰胺反应生成产物Biotin-HSA-AA-TCPP，分子式如下：

2.本发明Biotin-HSA-DDA-TCPP分子的制备方法是首先合成Biotin-HSA-DDA-TCPP分子，然后确定Biotin-HSA-DDA-TCPP分子能否在水中进行自组装及自组装后的聚集体形貌；其次，将亲脂性的抗癌药物阿霉素负载到Biotin-HSA-DDA-TCPP纳米载体中形成Biotin-HSA-DDA-TCPP-Dox纳米药，采用有机溶剂挥发法进行阿霉素的包载，并确定包载率；然后，体外模拟肿瘤微环境对Biotin-HSA-DDA-TCPP-Dox纳米药进行体外释放研究，确定pH值对Biotin-HSA-DDA-TCPP-Dox纳米药体外释放的影响；最后，评价Biotin-HSA-DDA-TCPP分子的细胞毒性及Biotin-HSA-DDA-TCPP-Dox纳米药的抗癌活性以及光动力治疗作用。

3.本发明Biotin-HSA-DDA-TCPP分子的合成方法：

S1分子的合成：将1g HSA经透析纯化得0.91g纯品HSA，取17mg Biotin，15mg EDC·HCl，10mg NHS，加100mL水进行超声溶解，于60℃油浴锅中进行加热搅拌48h，精确称取HSA0.45g加入至圆底烧瓶中，反应36h，后将圆底烧瓶从油浴锅中移出，静置20min，出现少许沉淀，抽滤收集下清液，进行冷冻干燥，将冷冻干燥后的样品使用适量蒸馏水超声溶解，将溶液于透析袋(MW 8000-14000)进行透析纯化，透析后的样品冷冻干燥得纯品Biotin-HSA。

S2分子的合成：将0.1971g S1置于250mL圆底烧瓶中，加入70mL纯水将其溶解后再加入催化剂0.0102g NHS和0.0104g EDC·HCl，利用超声使其全部溶解，搅拌48小时，将0.0059g1,12-二氨基十二烷(JK Scientific)用70mL纯水溶解后倒入圆底烧瓶中，反应56小时后，抽滤收集下清液，进行冷冻干燥，将粗品溶液置于透析袋(MW8000-14000)中透析纯化，得纯品Biotin-HSA-DDA。

Biotin-HSA-DDA-TCPP分子的合成:称量0.0583g TCPP置于250mL圆底烧瓶中，加入100mL无水乙醇将其溶解，加入催化剂0.017gEDC·HCl、0.01gNHS活化24h，另外将0.1346gS2用50mL纯水溶解后倒入圆底烧瓶，搅拌反应48h，反应完成后进行冷冻干燥，冷冻干燥后的样品于透析袋(MW8000-14000)中进行透析纯化，直至透析介质由红变澄清，并经过荧光光谱仪检测透析袋外水溶液在650nm无发射峰，最后冷冻干燥得纯品Biotin-HSA-DDA-TCPP。

4.本发明采用有机溶剂挥发法对载体进行阿霉素的包载，得到Biotin-HSA-DDA-TCPP-Dox纳米药。

5.本发明Biotin-HSA-DDA-TCPP-Dox纳米药具有pH响应性的释放特征。

6.本发明细胞实验和动物实验表明Biotin-HSA-DDA-TCPP聚集体其特征是具有极低的细胞毒性以及一定的光动力治疗活性。

7.本表明细胞实验和动物实验表明Biotin-HSA-DDA-TCPP-Dox纳米药其特征是抗癌活性具有剂量依赖性，低毒性，并且具有较好的抗癌效果以及一定的光动力治疗活性。

8.本发明Biotin-HSA-DDA-TCPP聚集体可应用于光动力治疗。

9.本发明Biotin-HSA-DDA-TCPP-Dox纳米药可应用于抗肿瘤及其光动力治疗。