[发明专利]一种预防COVID-19的疫苗及其制备方法

权利要求书

1.一种预防COVID-19的疫苗，其特征在于：所述的疫苗的抗原的核苷酸序列为SEQIDNO:1，氨基酸序列为SEQ ID NO: 2。

2.根据权利要求1所述的一种预防COVID-19的疫苗，其特征在于：所述的疫苗抗原由三部分组成，编码SARS-CoV2 的受体结合结构域的核苷酸序列 SEQ ID NO:3、编码自切割肽T2A的核苷酸序列SEQ ID NO:4，以及编码N蛋白T细胞反应肽段的核苷酸序列SEQ ID NO:5。

3.根据权利要求2所述的一种预防COVID-19的疫苗，其特征在于：所述的编码SARS-CoV2 的受体结合结构域的多核苷酸进行密码子优化，氨基酸序列为 SEQ ID NO:6；自切割肽T2A氨基酸序列为SEQ ID NO:7； N蛋白T细胞反应肽段氨基酸序列为SEQ ID NO:8。

4.根据权利要求2或3所述的一种预防COVID-19的疫苗，其特征在于：所述的编码SARS-CoV2 的受体结合结构域为RBD，所述的编码N蛋白T细胞反应肽段为Ntap。

5.一种如权利要求1或2所述的预防COVID-19的疫苗的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

（1）首先构建能分泌表达GP96-hFc的慢病毒载体，感染并筛选出能稳定分泌表达GP96-hFc的HEK293T的细胞系，所述GP96-hFc的核苷酸序列如SEQ ID NO:9所示，蛋白序列如SEQID NO:10所示；

（2）构建能嵌合表达SARS-CoV2 的受体结合结构域和N蛋白T细胞反应肽段的慢病毒载体，并在步骤1）的基础上筛选出能分泌表达GP96-hFc同时嵌合表达SARS-CoV2 的受体结合结构域和N蛋白T细胞反应肽段的HEK293T的细胞系；

（3）在无菌的条件下收集步骤2）所得的细胞，并用无菌的生理盐水或PBS清洗，调整细胞浓度为1×10⁶~1×10⁷/100μL，得到预防COVID-19的疫苗。

6.根据权利要求5所述的一种预防COVID-19的疫苗的制备方法，其特征在于：所述的步骤（3）中的预防COVID-19的疫苗为活细胞、丝裂霉素B或放射线处理细胞及细胞裂解液。

7.根据权利要求5所述的一种预防COVID-19的疫苗的制备方法，其特征在于：所述的HEK293T的细胞系为满足抗原表达的同源或异源细胞。

8.一种如权利要求1所述的疫苗在制备预防SARS-CoV2病毒的药物中的用途。

9.根据权利要求8所述的疫苗在制备预防SARS-CoV2病毒的药物中的用途，其特征在于：所述的疫苗进一步加工为DNA疫苗、RNA疫苗、蛋白疫苗或重组病毒疫苗。