[发明专利]一种细胞培养用血清替代物

说明书

本发明公开了一种细胞培养用血清替代物，每升血清替代物中包括下述组分：氨基酸140‑165mg、门冬酰胺15‑20mg、VC15‑25μM、维生素H70‑110μM、生育酚乙酸酯150‑200μM、生育酚80‑120μM、维生素A10‑15μM、牛垂体提取物15‑25g、胰岛素样生长因子I80‑120μg、过氧化氢酶250‑350μg、人重组胰岛素450‑550μg、人转铁蛋白5000‑10000μg、超氧化物歧化酶5000000U、皮质酮5mM‑20mM、D‑半乳糖150000‑250000mM、盐酸乙醇胺100‑150mM、谷胱甘肽49‑165mM、盐酸左旋肉碱80‑120mM、无机盐140.901‑161.403mg和Pluronic F‑68 5‑15g。

技术领域

本发明涉及生物工程术领域，更具体地说是涉及一种细胞培养用血清替代物。

背景技术

动物血清是细胞培养中用量最大的天然培养基，含有丰富的细胞生长必须的营养成分，常用于动物细胞的体外培养。其主要包括胎牛血清、小牛血清、成牛血清、马血清、羊血清、鸡血清、兔血清等，其中以胎牛血清的使用最为普遍。动物血清在细胞培养中提供细胞增殖所需的生长因子、激素、转移蛋白、贴壁和铺展在培养基质上的因子、蛋白酶抑制剂和其他营养物质。使用血清的优点是血清含有促进细胞增殖和维持的大部分因子，它几乎是通用的生长添加物，适用于动物、人和昆虫细胞等的细胞培养。因而使用血清不需要为每一个细胞系优化培养基，节省了大量时间和精力。

然而，目前有研究表明，动物血清的量使用不当，会对细胞的生长产生抑制和毒性，而且，动物血清的成分并不是十分明确，其组分可能对实验研究产生影响，不利于进行细胞代谢的基础研究和特定组分对细胞作用的研究。如果可以提供一种人工细胞培养基来替代动物血清，就可有效避免上述问题的产生。

因此，如何提供一种动物血清替代物是本领域技术人员亟需解决的技术问题。

发明内容

有鉴于此，本发明以人工配置的培养基替代血清，提高了细胞的活力和细胞的密度，降低了细胞内毒素含量，减少了生产成本。

一种细胞培养用血清替代物，每升血清替代物中包括下述组分：氨基酸140-165mg、天门冬酰胺15-20mg、VC15-25μM、维生素H70-110μM、生育酚乙酸酯150-200μM、生育酚80-120μM、维生素A10-15μM、牛垂体提取物15-25g、胰岛素样生长因子I80-120μg、过氧化氢酶250-350μg、人重组胰岛素450-550μg、人转铁蛋白5000-10000μg、超氧化物歧化酶5000000U、皮质酮5mM-20mM、D-半乳糖150000-250000mM、盐酸乙醇胺100-150mM、谷胱甘肽49-165mM、左旋肉碱盐酸盐80-120mM、无机盐140.901-161.403mg和Pluronic F-685-15g。

以上组分的技术效果是：

氨基酸：氨基酸是蛋白质的组成成分及嘌呤和嘧啶碱基合成的前体物质，参与细胞的生长代谢，培养基中氨基酸的浓度通常限制着细胞生长所能达到的最大密度及细胞活力状态；

天门冬酰胺：天门冬酰胺通常作为微生物培养使用，一般不作为培养基的组分，而本发明将天门冬酰胺作为细胞培养基的组分，可以作为细胞合成天门冬氨酸的主要组分；

VC：在细胞生长代谢过程中，具有促进细胞生长和保护细胞免受氧自由基损伤的作用；

维生素H：维生素H可以作为细胞内多种酶的辅酶，能够起到辅助性的作用，维生素H还可以参与细胞内的脂肪酸和碳水化合物的代谢；

生育酚乙酸酯：作为维生素E的衍生物，在细胞新陈代谢过程中有防止细胞膜和细胞内不饱和脂肪酸等易氧化物被氧化，从而保护细胞膜的完整进而防止衰老的作用；

生育酚：即维生素E，可降低细胞的耗氧量，预防细胞的衰老；