[发明专利]一种青贮菠萝渣组合饲料及其研究方法

权利要求书

1.一种青贮菠萝渣组合饲料，其特征在于：该组合饲料包括青贮玉米和青贮菠萝渣，所述青贮玉米和所述青贮菠萝渣按照干物质比例为50％-25％：50％-75％。

2.一种青贮菠萝渣组合饲料的研究方法，其特征在于：包括以下步骤：

步骤一：材料与方法的确定：

1.1、试验设计：将青贮玉米与青贮菠萝渣按照干物质比例100:0、75:25、50:50、25：75、0:100分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ五组，每组设置三个重复，两个空白，发酵时间为3、6、12、24、48h五个时间点，发酵结束时终止微生物活动，测定发酵液及发酵渣各项指标；

1.2、试验材料：青贮玉米选取文玉3号于广东海洋大学试验基地种植，蜡熟期收获，留茬25cm，青贮90天，开封烘干，粉碎过40目筛；青贮菠萝渣由雷州市食品加工公司提供，青贮时加入纤维素酶0.3g·kg^-1(≥10000u/g，由中国台湾亚芯生物科技有限公司提供)，青贮35天，开封烘干，粉碎过40目筛；瘤胃液供体羊选取两只雷州山羊体重25.5kg-28.5㎏，健康状况良好；

1.3、发酵液制备与体外培养：人工唾液按照参考文献“Menke K H,Raab L,SalewskiA,et al.The estimation of the digestibility and metabolizable energy content ofruminant feeding stuffs from the gas production when they are incubated withrumen liquor in vitro.[J].The Journal of Agricultural Science,1979,93(1):217-222”的方法制备；瘤胃液于晨饲前取自雷州山羊；按照参考文献“Mauricio R M,Mould F,Owen E.Comparison of rumen liquor and faeces from cows as sources of micro-organisms for the in vitro gas production technique.[J].Arquivo Brasileiro deMedicina Veterinária e Zootecnia,1998,50(5):569-572”的方法将人工唾液与瘤胃液按照9:1均匀混合，期间不断通入二氧化碳，制成人工瘤胃液；

1.4、相关指标的测定：试验原料及发酵产物参照参考文献“Cunniff P A,Jee MH.Official Methods of Analysis of AOAC International(16th end)[J].Trends inFood Science and Technology,1995,6(11):382”的常规方法测定干物质(dry matter,DM)、粗灰分(crude ash,Ash)、粗蛋白(crude protein,CP)和钙(Ca)磷(P)；纤维滤袋法(AnkomⅡ00i)测定中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(acid detergent fiber,ADF)，蒸馏法参照参考文献“朱文涛,雒秋江,古丽尼沙,等.4种日粮条件下30-150日龄羔羊瘤胃消化代谢功能的变化[J].畜牧兽医学报,2005,(11):38-42”测定氨态氮，S220-K型酸度计测pH，液相色谱法(Thermo Vanquish UHPLC)测定VFA；

某养分降解率＝[(试验原料中某养分含量－发酵后滤渣中某养分含量)/试验原料中某养分含量]×100％；

组合效应值＝[(实测值–加权估计值)/加权估计值]×100％；

式中：实测值为样品实际测定消化率；加权估算值＝A样品实测值×A样品配比+B样品实测值×B；

1.5、数据的处理与分析：试验数据经Excel 2010整理后采用SPSS 20.0软件ANOVA模型进行单因素方差分析，多重比较用LSD和Duncan氏法结合的方法，结果用“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著；

步骤二：结果与分析：

2.1、青贮玉米与青贮菠萝渣组合对山羊体外瘤胃产气量的影响；

2.2、青贮玉米与青贮菠萝渣组合对山羊体外瘤胃pH、氨态氮的影响；

2.3、青贮玉米与青贮菠萝渣组合对山羊体外瘤胃总挥发性脂肪酸(TVFA)浓度的影响；

2.4、青贮玉米与青贮菠萝渣对山羊体外瘤胃TVFA的组合效应；

2.5、青贮玉米与青贮菠萝渣对山羊体外瘤胃干物质降解率(DMD)的影响；

2.6、体外瘤胃干物质降解率的组合效应；

2.7、青贮玉米与青贮菠萝渣组合对山羊体外瘤胃粗蛋白降解率(CPD)的影响；

2.8、青贮玉米与青贮菠萝渣组合对体外瘤胃粗蛋白降解率(CPD)的组合效应；

2.9、青贮玉米与青贮菠萝渣组合对山羊体外瘤胃中性洗涤纤维降解率(NDFD)的影响；

2.10、青贮玉米与青贮菠萝渣组合对体外瘤胃NDFD的组合效应；

2.11、体外发酵48h时各单项发酵指标的多项组合效应；

步骤三：对结果进行讨论：

3.1、青贮玉米与青贮菠萝渣组合对体外瘤胃产气量及营养物质降解率的影响；

3.2、青贮玉米与青贮菠萝渣组合对体外瘤胃挥发性脂肪酸的影响；

3.3、青贮玉米与青贮菠萝渣组合对组合效应的影响；

步骤四：得出结论。