[发明专利]一种浒苔中活性成分的高效分离分析方法

说明书

本发明公开了一种浒苔中活性成分的高效分离分析方法，对条浒苔的醇提物进行乙酸乙酯萃取获得条浒苔提取物，对条浒苔提取物高速逆流色谱进行分离纯化获得若干组分，对每个组分进行液质联用检测；高速逆流色谱采用的两相体系包括两种，第一种两相体系为叔丁基甲醚、乙腈、水按体积比为3.5～4.5:1:4.5～5.5，第二种两相体系为叔丁基甲醚、正丁醇、乙腈、水按体积比为2.5～3.5:0.9～1.1:1:4.5～5.5，使用时，第一种两项体系的下相作为固定相，第一种两项体系的上相和第二种两相体系的上相均作为流动相。本发明能够对浒苔中多酚类活性成分进行分离分析。

技术领域

本发明涉及浒苔活性成分的高效分析方法，具体涉及一种浒苔中活性成分的高效分离分析方法。

背景技术

公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

浒苔属(Enteromorpha)在分类学上属于绿藻门(Chlorophyta)、石莼目(Ulvales)、石莼科(Ulvaceae)，主要有条浒苔(Enteromorpha clathrata)、肠浒苔(E.intestinalis)、扁浒苔(E.compressa)、浒苔(E.prolifera)、缘管浒苔(E.linza)5种，生长在潮间带。浒苔是一种绿潮藻类，具有很高利用价值的藻类资源，研究表明浒苔含有丰富的营养成分。需要对浒苔的成分进行详细的挖掘、深入分析成分。

据发明人研究发现，目前海藻的研究主要集中于多糖的研究，对于多酚的研究比较少，对于多酚的分离纯化主要使用传统分离方法。传统分离纯化方法主要有：大孔树脂分离和制备液相分离。大孔树脂分离的缺点主要有：(1)有机残留物高，预处理难度大；(2)强度差，使用过程中破损严重，使用寿命短；(3)粒径分布广，分离效果差。制备液相分离的缺点主要有：效率低下，收率低，对于过于复杂的混合物，纯化效果不理想。

发明内容

为了解决现有技术的不足，本发明的目的是提供一种浒苔中活性成分的高效分离分析方法，能够对浒苔中含多酚类活性成分的小分子化合物进行分离分析。

为了实现上述目的，本发明的技术方案为：

一种浒苔中活性成分的高效分离分析方法，对条浒苔的醇提物进行乙酸乙酯萃取获得条浒苔提取物，对条浒苔提取物高速逆流色谱进行分离纯化获得若干组分，对每个组分进行液质联用检测；

高速逆流色谱采用的两相体系包括两种，第一种两相体系为叔丁基甲醚、乙腈、水按体积比为3.5～4.5:1:4.5～5.5，第二种两相体系为叔丁基甲醚、正丁醇、乙腈、水按体积比为2.5～3.5:0.9～1.1:1:4.5～5.5，使用时，第一种两项体系的下相作为固定相，第一种两项体系的上相和第二种两相体系的上相均作为流动相。

本发明经过试验发现，采用高速逆流色谱的两相体系影响对浒苔中活性成分的分离，采用本发明提供的两相体系能够实现对条浒苔中的活性成分初步分离，然后采用液质联用能够进一步对初步分离的活性成分进行进一步检测分离。

本发明的有益效果为：

本发明先采用高速逆流色谱对浒苔中多酚类活性成分进行初步分离，再采用液质联用对初步分离的每个组分进行检测，能够对浒苔的成分进行详细的挖掘、深入分析。

本发明采用特定的两相体系实现对浒苔中含多酚类活性成分的小分子化合物的初步分离，从而获得能够用于液质联用检测的多个组分。

附图说明

构成本发明的一部分的说明书附图用来提供对本发明的进一步理解，本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明，并不构成对本发明的不当限定。

图1为本发明实施例1的条浒苔粗品分离的高速逆流色谱图；

图2为本发明实施例1的高效液相色谱图；