[发明专利]一种浒苔中活性成分的制备方法

说明书

本发明公开了一种浒苔中活性成分的制备方法，对条浒苔的醇提物进行乙酸乙酯萃取获得条浒苔提取物，对条浒苔提取物高速逆流色谱进行分离纯化，采用高速逆流色谱进行分离纯化的步骤为，先采用在线收集模式获得按先后顺序获得组分I、组分II、组分III、组分IV、组分V、组分VI，再采用循环逆流色谱模式对组分I分离至少6次获得化合物3，采用循环逆流色谱模式对组分I分离至少5次，按照先后顺序依次获得化合物4、化合物1和化合物2。本发明提供的方法能够从浒苔中分离制备出多酚类化合物。

技术领域

本发明涉及浒苔有效成分的高效制备方法，具体涉及一种浒苔中活性成分的制备方法。

背景技术

公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

浒苔属(Enteromorpha)，隶属绿藻门(Chlorophyta)、绿藻纲(Chlorophyceae)、石莼目(Ulvales)、石莼科(Ulvaceae)，藻体鲜绿色，细胞壁为单层细胞，围成中空管，细胞单核，片状叶绿体；广泛分布在海洋水体中，资源丰富，富含多糖、蛋白质、维生素、微量元素等，可用于食用、药用和饲料等。近年来，我国黄海海域连续多年发生绿潮灾害。自2007年来，以浒苔为主的绿潮暴发性的增殖、聚集、形成大规模灾害。造成海洋水体缺氧、鱼虾死亡，给生态环境带来直接和间接的经济损失。可为浒苔的经济价值和营养价值作进一步地探索。浒苔中活性成分的分离技术并不完善，传统技术具有效率低、耗时长、成本高的缺点。现如今，急需一种高效的技术应用于分离。

高速逆流色谱(high-speed countercurrent chromatography，HSCCC)是20世纪80年代发展起来的一种连续高效的液-液分配色谱分离技术，它不用任何固态的支撑物或载体。它利用两相溶剂体系在高速旋转的螺旋管内建立起一种特殊的单向性流体动力学平衡，当其中一相作为固定相，另一相作为流动相，在连续洗脱的过程中能保留大量固定相。它相对于传统的固-液柱色谱技术，具有适用范围广、操作灵活、高效、快速、制备量大、费用低等优点。目前HSCCC技术正在发展成为一种备受关注的新型分离纯化技术，已经广泛应用于生物医药、天然产物、食品和化妆品等领域，特别在天然产物行业中已被认为是一种有效的新型分离技术，适合于中小分子类物质的分离纯化。因此，浒苔中活性成分的分离结合高速逆流色谱技术具有广阔的发展前景。

然而经过发明人研究发现，浒苔中含有多种多酚类活性成分，采用高速逆流色谱不仅难以对多酚类活性成分进行检测，而且难以对其中的多酚类活性成分进行分离制备。

发明内容

为了解决现有技术的不足，本发明的目的是提供一种浒苔中活性成分的制备方法，该方法能够从浒苔中分离制备出多酚类化合物。

为了实现上述目的，本发明的技术方案为：

一种浒苔中活性成分的制备方法，对条浒苔的醇提物进行乙酸乙酯萃取获得条浒苔提取物，对条浒苔提取物高速逆流色谱进行分离纯化，采用高速逆流色谱进行分离纯化的步骤为，先采用在线收集模式获得按先后顺序获得组分I、组分II、组分III、组分IV、组分V、组分VI，再采用循环逆流色谱模式对组分I分离至少6次获得化合物3，采用循环逆流色谱模式对组分III分离至少5次，按照先后顺序依次获得化合物4、化合物1和化合物2；组分II为化合物4，组分IV为化合物5，组分V为化合物6，组分VI为化合物7；

其中，高速逆流色谱的溶剂体系为由正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水按组成，正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水体积比为1:8.5～9.5:0.9～1.1:8.5～9.5；

化合物1为对苯二酚，化合物2为没食子酸，化合物3为没食子儿茶素，化合物4为咖啡因，化合物5为(-)-表儿茶素，化合物6为(-)-表儿茶素没食子酸酯，化合物7为表儿茶素没食子酸酯。