[发明专利]CREG蛋白在巨核细胞成熟分化促血小板生成中的医药用途

说明书

本发明涉及E1A激活基因阻遏子（CREG）蛋白的医药用途，涉及CREG蛋白在巨核细胞成熟分化促血小板生成中的医药用。CREG蛋白在制备用于预防和/或治疗血液系统疾病的药物中的用途。检测CREG蛋白表达水平的试剂在制备用于诊断用于诊断血液系统疾病的试剂盒中的用途。实验证明CREG基因敲除小鼠骨髓巨核细胞的成熟障碍，多倍体化受阻。在细胞学水平，CREG在Dami细胞的成熟中表达量逐渐升高；CREG的减少能够显著地影响巨核细胞特异性标记物蛋白CD41a/CD62P的表达，并且细胞多倍体过程障碍。给予外源重组CREG蛋白能够促进细胞多倍体化的过程，提高CD41a/CD62P的表达。C/EBPβ与CREG蛋白启动子区结合，调控CREG的表达。因此，CREG蛋白能够促进巨核细胞的成熟分化，并可能促进血小板的生成。

技术领域

本发明涉及E1A激活基因阻遏子（CREG）蛋白的医药用途，涉及CREG蛋白在巨核细胞成熟分化促血小板生成中的医药用途，具体涉及CREG蛋白在制备用于对巨核细胞成熟分化促血小板生成具有明确保护作用的药物中的用途。

背景技术

临床研究已经发现血小板减少性疾病包括特发性血小板减少性紫癜（idiopathicthrombocytopenic purpura，ITP）、骨髓增生异常综合征（myelodysplastic syndrome，MDS）和急性巨核细胞白血病等血液系统疾病中巨核细胞分化成熟障碍，患者血小板不同程度的减少，引起严重的临床症状。巨核细胞成熟障碍主要表现在骨髓巨核细胞数目正常或增多，但产板型巨核细胞减少，引起血小板减少。巨核细胞是骨髓中唯一的多倍体细胞，主要负责血小板的生成和参与凝血等重要功能，而细胞的多倍体状态与产生血小板的质量和数量密切相关。成熟的巨核细胞由造血干细胞经巨核系祖细胞，原始巨核细胞、幼稚巨核细胞以及颗粒性巨核细胞分化而来。巨核细胞在成熟分化的过程中细胞体积和染色体倍体均增加，会逐渐出现血小板分界膜系统。巨核细胞成熟分化受很多因素调控，其成熟分化障碍的发病机制仍不十分清楚。因此，更好地理解导致巨核细胞成熟分化障碍的分子机制，为血小板减少疾病的防治提供新的治疗靶点和临床依据。

E1A激活基因阻遏子基因（Cellular Repressor of E1A-stimulated Genes，CREG）是一种新型的小分子量糖蛋白，早期研究发现CREG在分化成熟的组织中广泛表达，尤其在心肌、血管等循环组织中高表达，提示可能参与组织分化稳态的维持。发明人自2000年来一直致力于CREG对心血管系统的内稳态调控研究。研究发现，CREG能够减轻血管内皮细胞炎症损伤，对抗动脉粥样硬化及血管重塑的发生和发展，能够通过调节心肌细胞自噬与凋亡进而显著延缓心肌纤维化，改善心功能等，这些研究成果相继发表在ATVB、Cardiovascular Research及BBA 等杂志，明确了 CREG 是维持心血管稳态的关键调控因子，其参与调控心血管疾病的发生进展。

发明人经实验研究已经发现：（1）CREG在人和小鼠的巨核细胞中大量表达；（2）Creg^-/-小鼠骨髓中巨核细胞由于CREG的缺失导致多倍体化过程的障碍；（3）在PMA的刺激下Dami细胞系逐渐分化，CD41a/CD62P在mRNA和蛋白水平表达上调，CREG同样在mRNA和蛋白水平表达上调；（4）在Dami细胞系中CREG的敲减导致CD41a/CD62P的表达量下降，细胞多倍体化受阻。（5）在Dami细胞系中C/EBPβ是调控CREG促进Dami细胞成熟分化的重要分子。

因此，发明人提出了研究假设： CREG调控了巨核细胞的成熟分化，促进血小板的生成。为验证该假设，发明人拟研究CREG基因敲除小鼠骨髓巨核细胞的成熟情况，以及血小板的数目及功能；通过在Dami细胞中研究CREG调控巨核细胞的成熟分化和促进血小板生成的分子机制。该研究的完成有可能为血小板减少疾病的治疗提供新的靶点和实验依据。

发明内容

本发明的目的在于提供CREG蛋白在巨核细胞成熟分化促血小板生成中的医药用途。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案。