[发明专利]一种螺旋藻硒多糖的制备方法

权利要求书

1.一种螺旋藻硒多糖的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

S1、前处理：将螺旋藻粉在50℃干燥8-10h，降至室温，30-35℃球磨5-7天；

S2、蛋白质分离：将步骤S1处理过的螺旋藻粉与水按照重量比1:1-2溶解，加入混合溶液，充分搅拌后再3000-4000r/min离心20-30min，除去两相界面的蛋白质，收集上层滤液，重复加入混合溶液进行离心洗涤操作5-6次后，最后所得的上层滤液用无水乙醇醇沉至含醇量为80％，在4℃静置24h后，离心收集沉淀物，真空干燥，得到螺旋藻粗多糖；

S3、纯化多糖：将步骤S2所得螺旋藻粗多糖用纯化水洗涤3-4次后，在10000-12000r/min离心10-15min，收集沉淀物，真空干燥，得到纯化多糖；

S4、硫酸酯化反应：将吡啶冷却至-10～-5℃，缓慢加入氯磺酸，然后加入步骤S3的纯化多糖，在80-90℃下保温1-1.5h，冷却至室温，加入冰水，再加入乙醇，沉淀析出，过滤，得到第一滤饼，将滤饼在50％酒精溶液中进行打浆，升温，再降温至-5-0℃，过滤，得到第二滤饼，在45-50℃下进行干燥，得到螺旋藻多糖硫酸酯化物；

S5、硒酸酯化反应：将步骤S4中所得的螺旋藻多糖硫酸酯化物加入到混酸中，加入硒化试剂、助剂，在N₂保护的条件下，在60-70℃下，反应6-7h；进行后处理后得到所述螺旋藻硒多糖。

2.根据权利要求1所述的螺旋藻硒多糖的制备方法，其特征在于：所述步骤S5中，所述混酸包括浓度为0.6％的硝酸和浓度为0.2％的高氯酸。

3.根据权利要求1所述的螺旋藻硒多糖的制备方法，其特征在于：所述步骤S5中，所述硒化试剂为亚硒酸钠或亚硒酸钾中的一种。

4.根据权利要求1所述的螺旋藻硒多糖的制备方法，其特征在于：所述步骤S5中，所述助剂为氯化钡。

5.根据权利要求1所述的螺旋藻硒多糖的制备方法，其特征在于：所述步骤S5中，所述后处理过程为反应结束后，在N₂保护的条件下，冷却物料至20-25℃，加入碳酸钠，调节pH＝6-7，过滤，得到一次滤液，一次滤液中再加入适量的无水硫酸钠，搅拌后静置1-2h过滤，得到二次滤液。

6.根据权利要求5所述的螺旋藻硒多糖的制备方法，其特征在于：所述步骤S5中，所述二次滤液，装入透析袋中用流水透析过夜，然后取少量透析液加入抗坏血酸检测，至无红色时停止透析，然后减压蒸馏至稠膏状，用无水乙醇沉淀，在冰箱中放置过夜，抽滤后沉淀用无水乙醇洗涤，真空干燥。