[发明专利]一种测定人血清脂蛋白磷脂酶A2试剂盒及其制备和使用方法

说明书

一种测定人血清脂蛋白磷脂酶A2试剂盒，涉及医学及生物化学技术领域，包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，试剂R1包括：Tris缓冲液、Tween20、二价金属盐、Proclin300，溶剂为纯化水；试剂R2包括：MES缓冲液、EDC、乳胶微球、Lp‑PLA₂单克隆抗体1、Lp‑PLA₂单克隆抗体2、BSA、Proclin300，溶剂为纯化水。本发明还公开了一种测定人血清脂蛋白磷脂酶A2试剂盒的制备方法和使用方法。本发明相比现有技术的优点在于：本发明采用胶乳免疫增强比浊法，同时添加的二价盐又使得与酶法检测结果高度相关，能为临床提供准确，高效，稳定的Lp‑PLA₂解决方案。

技术领域

本发明涉及医学及生物化学技术领域，尤其涉及一种测定人血清脂蛋白磷脂酶A2试剂盒及其制备和使用方法。

背景技术

大量流行病学资料及临床研究结果表明，动脉粥样硬化性心血管疾病(ASCVD)是目前危害人类健康的首要致死和致残原因。ASCVD是由血脂异常、高血压、年龄、糖尿病、吸烟等各种危险因素所致的动脉系统慢性炎症性疾病。目前国内外指南均采用传统危险因素(不包括炎症指标)为基础的模型预测ASCVD患者的短期和长期风险，但临床实践中仍存在一些具体问题，如危险因素相同的个体发生心血管病事件的风险存在差异、某些不具备传统危险因素的患者仍然发生心血管病事件、接受足量他汀类药物治疗的患者仍有较高心血管剩留风险等。传统危险因素联合生物标志物有望能更全面地评估ASCVD患者的风险,超敏C反应蛋白(hs-CRP)是经典炎症指标，但无血管特异性。近年研究发现，脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PLA₂)不仅具有血管特异性，而且是冠心病和缺血性卒中的独立危险因素。

目前测定血清(浆)Lp-PLA₂活性及质量两种方式均可反映Lp-PLA₂水平，但临床上推荐测定血清Lp-PLA₂质量，主要采用的方法有发光免疫测定和酶联免疫吸附试验，前者以上转发光免疫分析为代表，操作简单、重复性好，但结果偏差较大，后者以微孔板酶联免疫吸附测定试验(PLAC)法为代表，操作略显复杂，影响因素多，但作为高通量检测，可满足大样本量检测需求。目前乳胶免疫增强比浊法也被用于测定血清Lp-PLA₂质量，操作简单，省时省力，能反应被测物质的含量。专利CN106053808A公开一种测定脂蛋白磷脂酶A2的试剂盒及其制备方法，该技术存在的问题如下：但与酶法检测结果存在一定差异，临床样本符合率较差。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供了一种可有效提高该试剂盒与酶法试剂盒的临床样本符合率，相关性较好的测定人血清脂蛋白磷脂酶A2试剂盒。

本发明是通过以下技术方案实现的，一种测定人血清脂蛋白磷脂酶A2试剂盒，包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，包括的成分及相应含量为：

试剂R1：

试剂R2：

优选地，所述试剂R1中二价盐为Mg²⁺。

优选地，所述试剂R1中的表面活性剂为Triton X 100。

优选地，所述试剂R2中乳胶微球为聚丙乙烯乳胶微球。

优选地，所述试剂R2中乳胶微球的粒径为100-250nm。

一种测定人血清脂蛋白磷脂酶A2试剂盒的制备方法，包括如下步骤：

(1)配制试剂R1

a.按照试剂R1的组分含量，将Tris溶于纯化水中，搅拌均匀后，配置成缓冲液；