[发明专利]全化学成分HEK293细胞培养基及其应用

说明书

本发明提供一种全化学成分HEK293细胞培养基及其应用。所述培养基包括氨基酸、无机盐、维生素、微量元素、碳水化合物和有机分子。本发明的细胞培养基不含任何生长因子及其它蛋白添加物，无非化学成分界定组分；通过引入更多包括微量元素在内的组分，替代一般培养基设计中所必需的生长因子，支持HEK293细胞的高密度和高活率生长。

技术领域

本发明涉及细胞培养技术领域，具体地说，涉及一种全化学成分HEK293细胞培养基及其应用。

背景技术

近年来，随着基因工程技术的问世，培养基已被广泛用于多种细胞和微生物培养，包括各种动物细胞、植物细胞、细菌、真菌和病毒等。生物制药工业中的目标产物蛋白可以通过在液体培养基中培养细胞而大量生产。这些细胞为天然的或工程化的细胞，利用发酵罐等设备在液体培养基中快速成倍增长，并生产目标产物。这些产物有的直接从培养基中收集，有的从收获的细胞中提取获得。培养基提供细胞培养过程中所需的营养物质，在早期的细胞培养过程中，培养基配方以血清的化学组成和物理化学性质(如渗透压、pH值等)为基础。但不同类型的细胞在不同的培养环境中对于氧气/二氧化碳分压、营养物的需求有所不同，因此，培养基的配方取决于特定的细胞要求。一般而言，培养基的主要成分包括氨基酸、有机盐、无机盐、维生素、微量元素、碳源和其它有机分子等，各组分的浓度根据给定细胞的特定要求而相应调整。

自1990年开始出现无蛋白培养基PFM(含水解物)和完全化学成分限定培养基。从2000年以来，无动物源完全化学成分培养基持续优化，用以支持细胞高密度培养和高产物表达。全化学成分限定培养基具有批间差异小、可重复性高，容易进行纯化和下游加工，便于细胞功能的精确评估，减少抗生素使用量等优势。

发明内容

本发明的目的是提供一种全化学成分(无血清无蛋白无动物源性)HEK293细胞培养基及其应用。

为了实现本发明目的，第一方面，本发明提供一种全化学成分HEK293细胞培养基，所述培养基包括氨基酸、无机盐、维生素、微量元素、碳水化合物和有机分子；其中，氨基酸的组成及用量如下：

无机盐的组成及用量如下：

微量元素的组成及用量如下：

维生素的组成及用量如下：

碳水化合物和有机分子的组成及用量如下：

优选地，所述细胞培养基中：氨基酸的组成及用量如下：

无机盐的组成及用量如下：

微量元素的组成及用量如下：

维生素的组成及用量如下：

碳水化合物和有机分子的组成及用量如下：

进一步地，所述全化学成分细胞培养基的pH值为6.9-7.1。

第二方面，本发明提供所述培养基的配制方法，包括：按比例称取各组分，用水溶解，然后用水定容，并调pH至6.9-7.1。

第三方面，本发明提供所述培养基在哺乳动物细胞，特别是HEK293细胞或重组HEK293细胞体外培养中的应用。