[发明专利]一种还原氧化石墨烯丝素蛋白复合膜制备方法在审
申请号: | 202010853408.9 | 申请日: | 2020-08-23 |
公开(公告)号: | CN111939318A | 公开(公告)日: | 2020-11-17 |
发明(设计)人: | 鲍路姿;丁玉川;冯磊;黄弢 | 申请(专利权)人: | 苏州宣医智慧医疗科技有限公司 |
主分类号: | A61L27/08 | 分类号: | A61L27/08;A61L27/22;A61L27/54 |
代理公司: | 苏州高专知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 32474 | 代理人: | 孙晓宇 |
地址: | 215000 江苏省苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 还原 氧化 石墨 丝素 蛋白 复合 制备 方法 | ||
1.一种还原氧化石墨烯丝素蛋白复合膜制备方法,其特征在于:包括如下步骤:
S1:将桑蚕茧剪碎,称取5g桑蚕茧,然后将其置于2L浓度为0.02 mol/L Na2CO3溶液中煮沸30min,去除蚕丝表面丝胶蛋白,煮沸结束后用去离子水清洗脱胶丝素蛋白数次,并自然晾干:
S2:将S1制备的丝素蛋白在60℃下溶解于9M LiBr约4h,待丝素蛋白完全溶解后,用透析膜透析72h,得到质量体积分数为6-7 w/v%的丝素蛋白水溶液,将所述丝素蛋白水溶液存放在-20℃冰箱中冷冻处理:
S3:将S2制备的6-7 w/v% 丝素蛋白冷冻固体冷冻干燥处理,得到丝素蛋白固体粉末:
S4:将S3制备的丝素蛋白固体粉末加入六氟异丙醇(HFIP)溶剂中,过夜放置直至完全溶解,得到12.5 mg/mL 丝素蛋白HFIP溶液:
S5:将GO水溶液按照一定质量比(GO/丝素蛋白 wt%)加入S4制备的丝素蛋白HFIP溶液中,迅速搅拌均匀,GO质量分数为0.01~1 wt%:
S6:取24孔细胞培养板,每孔加入60μLS5制备的丝素蛋白/GO溶液,放置于通风橱内过夜自然干燥,待膜层干燥后,向孔板内加入 90%甲醇溶液2mL/孔,诱使丝素蛋白结构发生β-折叠结构转变,孔板至于通风橱内过夜自然晾干:
S7:次日,将孔板置于41 mmol/L 抗坏血酸溶液中,在95℃条件下加热5min得到丝素蛋白/rGO膜层:
S8:还原后,分别用去离子水、70%乙醇溶液清洗膜层3次,然后将样品转移至超净台内,用0.22μm孔径滤膜过滤后的70%乙醇溶液清洗3次,无菌PBS清洗3次,以待接种细胞使用。
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