[发明专利]一种用于诺氟沙星快速检测的黑磷比色/光热双模式可视化免疫层析检测方法

说明书

本发明提供了一种用于诺氟沙星快速检测的黑磷比色/光热双模式可视化免疫层析检测方法，属于免疫层析试纸条检测技术领域；所述检测方法采用的试纸条包括底板和在所述底板上依次黏附的加样垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述硝酸纤维素膜包括检测区和质控区；所述加样垫滴加有黑磷纳米片。本发明所述加样垫滴加的BP纳米片作为比色/光热显示剂。通过对T线处的热量进行采集和分析能够获得比色/光热数据，“比色/光热双读出”的方法提高了检测的准确性。

技术领域

本发明涉及免疫层析试纸条检测技术领域，尤其涉及一种用于诺氟沙星快速检测的黑磷比色/光热双模式可视化免疫层析检测方法。

背景技术

荧光免疫层析技术是基于抗原抗体特异性免疫反应的新型膜检测技术。该技术以固定有检测线(包被抗体或包被抗原)和质控线(抗抗体)的条状纤维层析材料为固定相，测试液为流动相，荧光标记抗体或抗原固定于连接垫，通过毛细管作用使待分析物在层析条上移动。目前的荧光免疫层析多为单一荧光读取，易受外界环境影响，检测准确度还有待提高。

发明内容

本发明的目的在于提供一种用于诺氟沙星快速检测的黑磷比色/光热双模式可视化免疫层析检测方法，本发明的磁检测方法具有检测准确性好的优点。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种检测诺氟沙星的磁性上转换荧光免疫层析试纸条，包括底板和在所述底板上依次黏附的加样垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述硝酸纤维素膜包括检测区和质控区，所述加样垫滴加有黑磷纳米片，使用时现用现制；所述结合垫包被有磁性上转换荧光复合微球标记的诺氟沙星单克隆抗体；所述检测区包被有诺氟沙星-牛血清白蛋白；所述质控区包被有二抗。

优选的，所述磁性上转换荧光复合微球为羧基修饰Fe@Fe₃O₄@UCP。

优选的，所述黑磷纳米片的制备方法包括：将无氧N-甲基吡咯烷酮水溶液和黑磷晶体粉末混合，超声液相剥离黑磷晶体后，以3500～4500rpm第一离心，收集上清液，以15000～18000rpm对所述上清液第二离心，收集沉淀，得到黑磷纳米片。

本发明还提供了一种诺氟沙星检测盒，包括盒体和盒盖；所述盒体内放置有上述方案所述磁性上转换荧光免疫层析试纸条1、激光发射组件2和光热信号采集组件3和充电组件4；所述盒盖上设置有用于磁性上转换荧光免疫层析试纸条固定的组件5；所述盒盖上开设有3个孔，分别为第一孔6、第二孔7和第三孔8。

优选的，所述第一孔6的直径为150mm；所述第二孔7和第三孔8的直径分别为90mm。

优选的，所述激光发射组件发射能够发射波长为808nm的激光。

本发明还提供了上述方案所述磁性上转换荧光免疫层析试纸条或者所述诺氟沙星试剂盒在检测诺氟沙星中的应用。

本发明的有益效果：本发明提供了一种检测诺氟沙星的磁性上转换荧光免疫层析试纸条，包括底板和在所述底板上依次黏附的加样垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述硝酸纤维素膜包括检测区和质控区，所述加样垫滴加有黑磷纳米片，使用时现用现制。本发明所述加样垫滴加的BP纳米片作为比色/光热显示剂，由于BP不能吸附蛋白复合物，因此在形成免疫复合物的位点不会将BP固定住。同理，直接暴露的那些包被原和二抗位点会将BP 固定住。BP水溶液呈现棕褐色，待侧流层析反应完成后能够通过根据T线和 C线处的颜色得到定性检测结果。通过对T线处的热量进行采集和分析能够获得比色/光热数据，根据采集的1min内的T线热量变化值进行定量检测，“比色/光热双读出”的方法提高了检测的准确性。

附图说明

图1为本发明试纸检测示意图及配套设备模式图；