[发明专利]用于还原络合态FeⅢ

权利要求书

1.一种用于还原络合态Fe^III的厌氧菌株，其特征在于，其命名为产酸克雷伯氏菌Klebsiella oxytoca LF-1，保藏号：GDMCC NO.60977，保藏时间：2020年3月11日。

2.基于权利要求1所述的用于还原络合态Fe^III的厌氧菌株的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、提取回流污泥，投加液体培养液曝气培养，然后将富集菌液的离心底物、液体培养基和L-Fe^III络合物加入血清瓶中，在摇床中培养，得到微生物群落；

S2、利用固体培养基结合平板划线法进行目标菌株的纯化分离，得到用于还原L-Fe^III的厌氧菌株。

3.根据权利要求2所述的用于还原L-Fe^III的厌氧菌株培养方法，其特征在于，上述步骤S1中，以液体培养基1L计，该液体培养基由如下重量的组分组成：

0.2g MgCl₂·6H₂O，0.008g ZnCl₂，0.0176g Na₂MoO₄·2H₂O，0.08g CaCl₂·2H₂O，0.02gCuSO₄·5H₂O，0.0192g CoCl₂·6H₂O，0.14g Na₂SO₃，0.25g NaNO₂，2g葡萄糖，0.0152gNiCl₂·6H₂O，1.2g K₂HPO₄·2H₂O，10.8g NaHCO₃，0.0792g MnCl·4H₂O，0.00112g H₃BO₃，用蒸馏水补至1L配成溶液；

L-Fe^III络合物的制备：是由EDTANa₂、Citrate、谷氨酸、赖氨酸分别与FeCl₃以摩尔比1:1的比例制成的，还原L-Fe^III络合物在35-40℃、pH＝6.7-6.9条件下进行。

4.根据权利要求2所述的用于还原L-Fe^III的厌氧菌株培养方法，其特征在于，上述步骤S2中，以固体培养基1L计，该固体培养基由如下重量的组分组成：

葡萄糖2.5g，K₂HPO₄·3H₂O 1g，KH₂PO₄ 0.625g，NaSO₃ 0.07g，MgSO₄ 0.1g，CaCl₂0.002g，MnSO₄ 0.0005g，Na₂MoO₄·2H₂O 0.0001g，CuSO₄·5H₂O 0.0001g，琼脂1.5-2.0％，加入1g·L^-1NaNO₂。

5.根据权利要求2或4所述的用于还原L-Fe^III的厌氧菌株培养方法，其特征在于，步骤S2的具体如下：

利用固体培养基结合平板划线法进行目标菌株的纯化分离，即取100μL前面反复纯化后的液体培养基中的微生物菌液，再通过固体培养基实验方法步骤利用平板划线到固体培养基上；放入40℃恒温培养箱进行培养；5天之后，同样用固体培养基试验方法挑出单菌落培养，在液体培养基中扩大培养得到还原菌种，然后将菌液加入消过毒的50mL离心管中在运行条件为5000r/min，15min，15℃的离心机下离心，弃去上清液，得到用于还原L-Fe^III的厌氧菌株。