[发明专利]一种脂肪组织冰冻切片的制备方法有效
申请号: | 202010856609.4 | 申请日: | 2020-08-24 |
公开(公告)号: | CN111912651B | 公开(公告)日: | 2022-04-05 |
发明(设计)人: | 黄红浪;付莉;李卫华;张维;肖凌云;汤雅玲;陈双龙;宋冰洁;童安祺 | 申请(专利权)人: | 厦门大学附属第一医院 |
主分类号: | G01N1/06 | 分类号: | G01N1/06;G01N1/28;G01N1/42 |
代理公司: | 厦门市新华专利商标代理有限公司 35203 | 代理人: | 罗恒兰 |
地址: | 361004 福建*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 脂肪 组织 冰冻 切片 制备 方法 | ||
1.一种脂肪组织冰冻切片的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:
(1)对冰冻切片机和速冻台进行预冷,将冰冻切片机箱温度设为-35℃,速冻台温度设为-40℃;
(2)将脂肪组织置于冰冻托头中央,并于脂肪组织周围的托头上滴加包埋剂,所述脂肪组织尺寸小于冰冻托头尺寸;
(3)将托头置于速冻台上进行冷冻处理,当脂肪组织最上部分临近完全冻凝前,采用速冻台上的冻锤放于脂肪组织上,平整脂肪组织表面,当脂肪组织完全冻凝后,取下冻锤,取出托头,并将其固定在冰冻切片机夹头中;
(4)将刀口对准脂肪组织,调整切片厚度为30μm,进行粗修片,待脂肪组织暴露最大面积之前,调整托头方向,使脂肪组织的实质组织丰富的灰白区域置于正下方,油性淡黄色脂肪细胞丰富的区域置于正上方;接着,调整切片厚度为10μm,进行细修片,直至脂肪组织暴露最大面积;
(5)取出托头,并将其放入速冻台上进行速冻;将冻锤置于脂肪组织上方,4-6分钟后,取下冻锤,取出托头;
(6)更换已在-40℃的速冻台进行预冷的新刀片,选择切片厚度为5μm;取出组织托头并将其固定在冷冻切片机中,使脂肪组织的实质组织丰富的灰白区域置于正下方,油性淡黄色脂肪细胞丰富区域置于正上方;
(7)进行脂肪组织切片;
(8)切片完成后,采用玻璃片进行贴片、固定,然后进行染色,并进行封片,即可得到脂肪组织切片。
2.根据权利要求1所述的一种脂肪组织冰冻切片的制备方法,其特征在于:所述脂肪组织尺寸为1×1×0.5cm。
3.根据权利要求1所述的一种脂肪组织冰冻切片的制备方法,其特征在于:所述包埋剂为普通胶水或OCT包埋剂。
4.根据权利要求1所述的一种脂肪组织冰冻切片的制备方法,其特征在于:所述步骤(7)具体为:右手转动冰冻切片机手轮,左手用排笔轻拉切片前端的空白固定胶水,配合右手转动手轮的速度轻慢的拉平切片;在完整有形组织完整切下来末端,右手停止轮动切片,左手停止向下拉片,轻轻将切片前端摁压在刀座上,使切片前端无法翻转卷起;然后左手用排笔尖部轻轻摁住切片末端左侧,右手继续向下轮转手轮到底部,完成整个切片动作。
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