[发明专利]一种土壤微生物群调节剂及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种土壤微生物群调节剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)制备酵母多肽：将酿酒酵母接种于S0培养基中进行培养，当氨氮去除率达到60％、总氮去除率达到50％、总磷去除率达到50％，且OD值大于1或细胞密度大于等于1.5×10⁸个/mL时，将菌体离心过滤，然后接种于S1培养基中进行培养，当酵母蛋白含量增幅超过180％-200％时，将菌体离心过滤，得到多肽累积的酿酒酵母；

将黏红酵母接种于S0培养基中进行培养，当氨氮去除率达到70％、总氮去除率达到60％、总磷去除率达到50％，且OD值大于1或细胞密度大于等于1.5×10⁸个/mL时，将菌体离心过滤，然后接种于S2培养基中进行培养，当酵母蛋白含量增幅超过180％-200％时，将菌体离心过滤，得到多肽累积的黏红酵母；

将所述多肽累积的酿酒酵母与所述多肽累积的黏红酵母置于S0培养基中进行共生培养，得到酵母共培养液；

所述酵母共培养液经离心洗涤去除培养基，得到酵母混合物；

将所述酵母混合物与水混合加热至47℃，再加入氢氧化钠至质量浓度为3％-4％，进行超声-碱液破壁处理，然后调节pH至中性，经离心处理，所得上清液为酵母上清液，所得沉淀经离心、干燥处理，得到酵母改性材料；

将所述酵母上清液在4℃下与95％乙醇混合，静置5h后离心，所得沉淀为酵母粗蛋白；

所述酵母粗蛋白与胃蛋白酶进行混合酶解处理，得到所述酵母多肽；

(2)制备改性高岭土：将偏高岭土、氧化钙、硅酸钠、所述酵母改性材料按照质量比为(80-85):(6-8):(2-4):(5-10)进行混合，然后加入10wt％的水粘合，经干燥、煅烧、过筛，得到所述改性高岭土；

(3)制备土壤微生物群调节剂：将步骤(1)所得酵母多肽与水按照1:10的质量比混合制成溶液，再加入步骤(2)所得改性高岭土混合吸附，且所述改性高岭土与所述溶液的质量比为1:25，得到所述土壤微生物群调节剂；

其中，所述S0培养基包括葡萄糖3g/L，Na₂HPO₄28.73mg/L、NH₄Cl 30mg/L、K₂HPO₄ 100mg/L、KCl50mg/L、MgSO₄ 7H₂O 40mg/L，pH为7.0；

所述S1培养基是将小米、糙米、藜麦按照5:(2-3):(2-3)的质量比混合后过筛得到的第一混合物与所述S0培养基混合得到，且所述第一混合物与所述S0培养基的质量比为1:9；

所述S2培养基是将大米、大豆、玉米按照(4-5):(2-3):(2-4)的质量比混合后过筛得到的第二混合物与所述S0培养基混合得到，且所述第二混合物与所述S0培养基的质量比为1:8。

2.根据权利要求1所述土壤微生物群调节剂的制备方法，其特征在于，所述接种于S1培养基中进行培养，以及所述接种于S2中进行培养的步骤中，所述培养的条件是：DO2-3mg/L，温度25℃，转速150rpm。

3.根据权利要求1所述土壤微生物群调节剂的制备方法，其特征在于，所述将菌体离心过滤的步骤中，所述离心的转速为1000rpm。

4.根据权利要求1所述土壤微生物群调节剂的制备方法，其特征在于，将所述多肽累积的酿酒酵母与所述多肽累积的黏红酵母置于S0培养基中进行共生培养的步骤中，所述多肽累积的酿酒酵母与所述多肽累积的黏红酵母的加入量之比为1:2。

5.根据权利要求1所述土壤微生物群调节剂的制备方法，其特征在于，将所述多肽累积的酿酒酵母与所述多肽累积的黏红酵母置于S0培养基中进行共生培养的步骤中，所述共生培养的条件是在25℃、150rpm下培养1d。

6.根据权利要求1所述土壤微生物群调节剂的制备方法，其特征在于，所述酵母共培养液经离心洗涤去除培养基的步骤中，所述离心的条件是在10000rpm下离心10min。