[发明专利]伯克霍尔德氏菌及其代谢物的制备方法和应用

说明书

本发明涉及生物技术领域，公开了一种伯克霍尔德氏菌及其代谢物的制备方法和应用。具体地，本发明提供了一种伯克霍尔德氏菌，该伯克霍尔德氏菌的保藏编号为GDMCC No.61058。一种制备伯克霍尔德氏菌的代谢物的方法，包括如下步骤：将伯克霍尔德氏菌经活化后与液体发酵培养基混合进行一次发酵，再与大孔树脂混合进行二次发酵，得到发酵液；将所述发酵液进行固液分离，得到固体混合物；将所述固体混合物与有机溶剂接触进行提取得到提取液，将所述提取液进行浓缩、离心、过滤，得到伯克霍尔德氏菌的代谢物。本发明还提供上述伯克霍尔德氏菌和代谢物在防治植物真菌性病害的病原菌中的应用。该伯克霍尔德氏菌对多种植物病原真菌均有较强的抑制效果，抑菌谱广。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种伯克霍尔德氏菌及其代谢物的制备方法和应用。

背景技术

由植物病原真菌引起土传病害影响农产品质量和数量，若防治不当将造成重大经济损失。目前化学农药仍是作物病害管理的主力军，然而，化学杀菌剂的长期使用污染环境，引起病原菌耐药，甚至会导致作物根际有益菌群的丢失。病原真菌能以孢子形式在土壤中长期存在，化学杀菌剂的一次喷洒难以彻底清除，而生防菌剂能在土壤中长期存活，通过分泌抑菌物质等机制抑制病原菌生长，提高作物抗病能力，为病害的防治提供了新思路。

植物根际中存在着一类能够促进植物根系生长和矿物质吸收、增强植物抗病性的细菌，即植物根际促生菌(plant growth promoting rhizobacteria， PGPR)，目前，芽孢杆菌属、链霉菌属的许多PGPR已经开发为商业生防菌剂。伯克霍尔德氏菌属(Burkholderia)隶属于变形菌门，β-变形菌纲，具有丰富的代谢多样性及较强的适应能力，在环境中分布广泛，于1992年从假单胞菌属独立出来，成为新属。伯克霍尔德氏菌具有一定的抑制植物病原菌生长或者促进植物生长或者修复土壤等功能，如进行有效利用将能够在农业生产和环境保护方面起到重要的作用。因此，开发和应用新的伯克霍尔德氏菌在植物病原真菌防治方面具有较大的意义，有利于开发更加安全高效的生防菌剂。

发明内容

本发明的目的是为了克服现有技术存在的问题，提供一种伯克霍尔德氏菌及其代谢物的制备方法和应用，该伯克霍尔德氏菌对多种植物病原真菌均有较强的抑制效果，抑菌谱广。

为了实现上述目的，本发明第一方面提供一种伯克霍尔德氏菌，所述伯克霍尔德氏菌(Burkholderia contaminans)于2020年7月21日送交广东省微生物菌种保藏中心(简称GDMCC，地址：中国广州市先烈中路100号省微生物所实验楼五楼)进行保藏，保藏编号为GDMCC No.61058。

本发明第二方面提供一种如式(I)所示的化合物：

本发明第三方面提供一种制备伯克霍尔德氏菌的代谢物的方法，包括如下步骤：

(1)将伯克霍尔德氏菌经活化后与液体发酵培养基混合进行一次发酵，再与大孔树脂混合进行二次发酵，得到发酵液；

(2)将步骤(1)得到的所述发酵液进行固液分离，得到固体混合物；

(3)将步骤(2)得到的所述固体混合物与有机溶剂接触进行提取得到提取液，将所述提取液进行浓缩、离心、过滤，得到伯克霍尔德氏菌的代谢物；

其中，所述伯克霍尔德氏菌的保藏编号为GDMCC No.61058。

优选地，步骤(1)中所述伯克霍尔德氏菌经活化后按照3-8体积％的接种量与所述液体发酵培养基混合；所述一次发酵的条件至少满足：温度为 25-35℃、转速为180-200r/min、时间为60-84h；所述液体发酵培养基包括：蛋白胨8-12g/L、牛肉膏2-5g/L、酵母膏3-8g/L、氯化钠3-8g/L， pH＝7-8。