[发明专利]miR-1468-5p在评估宫颈癌患者PD-L1表达中应用

说明书

本发明公开了miR‑1468‑5p在评估宫颈癌患者PD‑L1表达中应用，本发明首次发现了miR‑1468‑5p的表达水平与PD‑L1表达呈正相关，因此可以通过CCa患者miR‑1468‑5p的表达水平对PD‑L1表达进行评估；由于miR‑1468‑5p的表达水平可通过血浆外泌体进行检测，因此可以通过检测血浆外泌体中miR‑1468‑5p的表达水平即可实现PD‑L1表达水平的评估，实时性、灵敏性更强，且更方便；本发明还进一步提供了通过血浆外泌体中miR‑1468‑5p的表达水平对PD‑L1进行评估具体的方法，拓阔了PD‑L1检测渠道，且检测更准确，重复性好，对于宫颈癌临床预后评估具有重要的意义。

技术领域

本发明属于生物医学领域，涉及miR-1468-5p在评估宫颈癌患者PD-L1表达中应用。

背景技术

PD-L1也称为B7-H1或CD274，通过与程序性死亡1(PD-1)受体结合而促进T细胞功能障碍。作为主要的免疫检查点，PD-L1在塑造免疫抑制性肿瘤微环境中起着关键作用。多数肿瘤高表达PD-L1蛋白，与其不良预后密切相关。目前检测PD-L1的方式主要是免疫组化法，但是存在以下问题：1.采用“免疫组化法”直观检测肿瘤组织中PD-L1蛋白表达，但不能实现实时检测；2.免疫组化抗体多样性，评估层次不均一。因此，如何高效准确的判断肿瘤组织PD-L1表达量对评估患者临床预后至关重要。

液态活检是指以非侵入方式从体液中获得生物标记物并对其分析，从而反映其来源组织的相关信息的检测技术。随着社会的进步和医学技术的不断发展，对于恶性肿瘤精准诊治的要求不断提高。随着对肿瘤分子机制逐渐深入地研究，使得液态活检所涉及的研究内容从传统的肿瘤循环细胞(circulating tumor cell,CTC)和肿瘤循环DNA(circulating tumor DNA,ctDNA)发展至肿瘤细胞来源的外泌体。

肿瘤细胞来源的外泌体(exosome)富含肿瘤细胞特征性物质，尤其是miRNAs，并普遍存在于患者体液中，其能够将这些遗传信息或肿瘤信号通路转移至肿瘤微环境中，促进肿瘤转移，在应用于肿瘤的早期筛查和临床诊断中有显著优势。因此，开发一种能够通过液态活检对PD-L1表达进行评估的方法具有重要的意义。

发明内容

针对上述问题，本发明的目的是提供一种通过对宫颈癌(CCa)患者血浆外泌体miR-1468-5p表达水平的检测实时评估PD-L1表达，从而有效评估宫颈癌临床预后的方法。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：miR-1468-5p在评估宫颈癌患者PD-L1表达中应用。

本发明还要求保护miR-1468-5p PCR引物在制备PD-L1表达诊断试剂或试剂盒中的应用。

具体地，通过miR-1468-5p PCR引物检测宫颈癌患者样品中miR-1468-5p的表达，从而评估PD-L1表达。

作为本发明的优选实施方式，所述宫颈癌患者样品为血样。

本发明还要求保护miR-1468-5p PCR引物在制备宫颈癌临床预后诊断试剂或试剂盒中的应用。

具体地，通过miR-1468-5p PCR引物检测宫颈癌患者样品中miR-1468-5p的表达，从而评估PD-L1表达，进而实现宫颈癌临床预后的评估。

作为本发明的优选实施方式，所述宫颈癌患者样品为宫颈癌患者血样。

本发明还提供了一种通过血浆评估PD-L1表达的方法，包括如下步骤：

(1)、提取血浆外泌体；

(2)、通过miR-1468-5p PCR引物检测miR-1468-5p的表达量；

(3)、若miR-1468-5p的相对表达量≥1.793，说明PD-L1高表达，否则PD-L1低表达。