[发明专利]一种防掉片细胞DNA定量染色液及其制备方法在审
申请号: | 202010860790.6 | 申请日: | 2020-08-25 |
公开(公告)号: | CN111879592A | 公开(公告)日: | 2020-11-03 |
发明(设计)人: | 贺权源;刘朝前;谢凯 | 申请(专利权)人: | 湖南品胜生物技术有限公司 |
主分类号: | G01N1/30 | 分类号: | G01N1/30;C12Q1/68 |
代理公司: | 苏州中合知识产权代理事务所(普通合伙) 32266 | 代理人: | 胡朝冰 |
地址: | 410000 湖南省长沙市高新开*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 防掉片 细胞 dna 定量 染色 及其 制备 方法 | ||
1.一种防掉片细胞DNA定量染色液,包括:
试剂A,包括:硫堇、染色助剂和水;
试剂B,选自甲醇、叔丁醇、乙醇、乙二醇、盐酸、磷酸中的一种或多种;
试剂C,包括:亚硫酸盐和超纯水;
所述试剂A、试剂B和试剂C的体积比为5:1:4。
2.根据权利要求1所述的一种防掉片细胞DNA定量染色液,其特征在于,所述试剂A中,按重量份计,包括:硫堇50-150份,染色助剂20-50份,蒸馏水50-250份。
3.根据权利要求1所述的一种防掉片细胞DNA定量染色液,其特征在于,所述试剂B选自甲醇、叔丁醇、乙醇、乙二醇中的一种或多种,或者甲醇、叔丁醇、乙醇、乙二醇中的一种或多种与盐酸和/或磷酸的混合物。
4.根据权利要求3所述的一种防掉片细胞DNA定量染色液,其特征在于,甲醇、叔丁醇、乙醇、乙二醇中的一种或多种与盐酸和/或磷酸的体积比为7:1。
5.根据权利要求1所述的一种防掉片细胞DNA定量染色液,其特征在于,所述试剂C中,按重量份计,包括:亚硫酸盐20-50份和超纯水50-150份。
6.根据权利要求1所述的一种防掉片细胞DNA定量染色液,其特征在于,所述亚硫酸盐选自偏重亚硫酸钠、偏重亚硫酸钾、亚硫酸氢钠、亚硫酸钠中的一种或多种。
7.权利要求1-6任意一项所述的一种防掉片细胞DNA定量染色液的制备方法,包括如下步骤:
(1)配制试剂A,再加入试剂B,混合均匀;
(2)加入试剂C,恒温25-40℃磁力搅拌30-60min,得防掉片细胞DNA定量染色液。
8.根据权利要求7所述的一种防掉片细胞DNA定量染色液的制备方法,其特征在于,通过以下方法配制试剂A:按重量份称取硫堇劳氏紫粉末,加入烧杯中,用部分蒸馏水冲洗残留试剂,再加入染色助剂,余量用剩余蒸馏水补齐,然后加热沸腾10-30min,冷却至30-50℃,得试剂A。
9.根据权利要求7所述的一种防掉片细胞DNA定量染色液的制备方法,其特征在于,还包括将步骤(2)得到的染色液放入棕色瓶中,冷藏,有效期7天。
10.根据权利要求9所述的一种防掉片细胞DNA定量染色液的制备方法,其特征在于,每次使用染色液前快速取出所需用量至另一棕色瓶中提前5-15min预热。
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