[发明专利]一种测定婴幼儿奶粉中链格孢霉毒素残留的方法

说明书

本发明公开了一种测定婴幼儿奶粉中链格孢霉毒素残留的方法，属于食品安全检测技术领域。所述方法包括下列步骤：(1)样品制备；(2)固相萃取；(3)液相色谱检测。本发明提供的方法应用于实际样品的检测，结果显示，该方法操作简便、灵敏度强，重现性好，准确性高，完全可以满足日常对于链格孢霉毒素的检测要求。

技术领域

本发明涉及一种测定婴幼儿奶粉中链格孢霉毒素残留的方法，属于食品安全检测技术领域。

背景技术

欧盟食品安全局(European Food Safety Authority,EFSA)最新膳食暴露风险评估报告表明，低幼龄童对链格孢霉毒素的膳食暴露量最大，考虑到婴幼儿奶粉因其配料植物油易受到链格孢霉毒素污染，以及在婴幼儿膳食中的重要贡献，而成为重点关注的食品。

目前已鉴明的链格孢霉毒素约有70余种，从结构上区分主要可分为5类：第一类为二苯并吡喃酮类及其衍生物，主要包括链格孢酚(Alternariol，AOH)、交链格孢酚单甲醚(Alternariol mono-methyl ether，AME)和交链孢烯(Altenuene，ALT)；第二类为四氨基酸衍生物类，代表毒素为细交链格孢菌酮酸(Tenuazonic acid，TeA)及异细交链孢菌酮酸(iso-tenuazonic acid，iso-TeA)；第三类为二萘嵌苯醌类，包括ATX-I、ATX-II、ATX-III等一类衍生物；第四类为丙三羧酸酯类化合物，即AAL毒素，又可分为AAL-TA和AAL-TB两大类；第五类为包括腾毒素(Tentoxin，Ten)在内的其它结构类型。

链格孢霉毒素是一类重要的真菌毒素，但其限量标准目前仍未出台，导致该毒素检测技术发展较为缓慢。目前链格孢霉毒素的前处理方法通常采用QuEChERs法，但是对于奶粉基质，因其成分复杂，QuEChERs法在奶粉基质检测链格孢霉毒素的回收率效果不佳，并不适用于在奶粉基质中链格孢霉毒素的检测。因此，亟需寻找一种适用于在奶粉基质中链格孢霉毒素的检测方法。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供一种婴幼儿奶粉中7种链格孢霉毒素的液相色谱-串联质谱检测方法。

本发明披露了一种提取奶粉中链格孢霉毒素的前处理方法，所述方法包括以下步骤：

(1)提取：将奶粉放置于容器中，加入提取剂进行提取，取上清液后，氮吹；

(2)固相萃取：将步骤(1)氮吹后得到的溶液进行固相萃取，过膜；

所述步骤(1)中提取剂包含乙腈，所述提取剂中乙腈的体积百分数为70％～90％(v/v)；所述步骤(2)固相萃取后无需进行浓缩步骤。

在本发明一种实施方式中，所述链格孢霉毒素包括腾毒素(Ten)、交链孢烯(ALT)、交链格孢酚单甲醚(AME)、链格孢酚(AOH)、细交链格孢菌酮酸(TeA)、细格菌素(ATS)和/或链格孢菌毒素I(ATX-I)。

在本发明一种实施方式中，所述提取剂中还包括甲酸，甲酸的体积浓度为1-5％。

在本发明一种实施方式中，所述提取分为三次提取，三次提取剂均为乙腈水溶液，乙腈的体积百分数为70％～90％。

在本发明一种实施方式中，所述提取分为三次提取，三次提取剂中前两次为乙腈水溶液，乙腈的体积百分数为70％～90％；第三次提取剂为乙腈甲醇水溶液，乙腈、甲醇和水的体积比为(40-50)：(10-30)：(20-50)。

优选地，前两次提取液甲酸-乙腈-水溶液中甲酸的体积浓度为2％，乙腈的体积浓度为84％；第三次提取液甲酸-乙腈-甲醇-水溶液中甲酸的体积浓度为2％，乙腈的体积浓度为45％，甲醇的体积浓度为10％。

在本发明一种实施方式中，所述固相萃取条件为：固相萃取柱为HLB小柱，洗脱液为甲醇和乙腈。