[发明专利]先质干细胞培养的运输介质在审
申请号: | 202010877433.0 | 申请日: | 2020-08-27 |
公开(公告)号: | CN112442478A | 公开(公告)日: | 2021-03-05 |
发明(设计)人: | 陈革成;王美桦 | 申请(专利权)人: | 德国生物分子研究公司 |
主分类号: | C12N5/0735 | 分类号: | C12N5/0735;A01N1/02 |
代理公司: | 无锡市汇诚永信专利代理事务所(普通合伙) 32260 | 代理人: | 董京杜;张静汝 |
地址: | 德国埃登科本克洛斯*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 干细胞 培养 运输 介质 | ||
本发明公开一种先质干细胞培养的运输介质,由以下混合物组成,至少一种氨基酸,以提供细胞构建成分予细胞,至少一种维生素,以促进生长和增殖予细胞,至少一种无机盐,以维持细胞渗透平衡和膜电位,至少一种单糖,为能量来源,至少一种血清,以提供额外促进生长成分予细胞;和至少一种抗氧剂,以提升增殖和保存予细胞,所述抗氧剂是硫辛酸及其衍生物,其浓度范围为总运输介质配方的50至100μM,以改善长达7天前已获取的微小组织块的细胞活性和恢复能力。
技术领域
本发明涉及细胞的运输介质,尤其涉及运输含有先质干细胞和其它哺乳类在后续传代之前的微小组织块介质。
背景技术
所有多细胞生物都具有干细胞。干细胞是非专门化的细胞,有能力通过细胞分裂自我更新,间或还能在长时间的休止状态下如是。当暴露于特定的生长刺激集时,它们具有分化为多种专门细胞类型的能力。先质干细胞是部分分化的中间细胞类型。再生医学领域的从业者持续发掘干细胞的潜质。因此,干细胞可通过移植干细胞组织和/或器官修复靶向性为宿主治疗疾病。
运输介质是特别研制的介质以保存细胞。此类型的介质典型地缺乏营养,添加抗生素类以防生物污染物(诸如真菌和/或细菌)。干细胞通常在这种介质中运输24小时以确保细胞得以进行后续应用,同时仍保持其最佳活性和恢复能力。在运输期间,会发生细胞所有的基本生理过程直至凋亡(细胞死亡)。细胞凋亡的速率会随氧化应激同时增加,这是因为细胞耗尽运输介质中的营养物,以及细胞生理过程生产的活性氧(ROS)和其它自由基的产生而导致凋亡。这些问题将影响细胞增殖,导致基因组不稳定,并诱发衰老(老化)。
因此,本发明当前披露所提供的运输介质含有抗氧剂,以延长未分化和部分分化的干细胞在后续传代之前的保存。
发明内容
为了解决现有技术存在的缺陷,本发明提供一种先质干细胞培养的运输介质。
为实现上述目的,本发明采用的技术方案为:一种先质干细胞培养的运输介质,微小组织块含有细胞,由以下混合物组成,至少一种氨基酸,以提供细胞构建成分予细胞,至少一种维生素,以促进生长和增殖予细胞,至少一种无机盐,以维持细胞渗透平衡和膜电位,至少一种单糖,为能量来源,至少一种血清,以提供额外促进生长成分予细胞;和至少一种抗氧剂,以提升增殖和保存予细胞,所述抗氧剂是硫辛酸及其衍生物,其浓度范围为总运输介质配方的50至100μM,以提升长达7天前已获取的微小组织块的细胞活性和恢复能力。
另个体现本发明的方法是在使用运输介质,提供先质干细胞运输系统,就如所披露的提升长达7天前已获取的微小组织块的细胞活性和恢复能力。
运输介质的特征是定义明确的硫辛酸和/或其衍生物浓度范围为50和100μM。一种培养基包括在发明人确定范围内的硫辛酸,能够提供先质干细胞更高的细胞活性,可恢复长达168小时(7天)的细胞运输。
如此,本发明的运输介质能支持未分化和部分分化的哺乳类干细胞。
优选地,所述输送介质是可作为工作溶液。
优选地,输送介质包括甘氨酸、盐酸精氨酸、胱氨酸盐酸盐、组氨酸盐酸盐(水合)、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸盐酸盐、蛋氨酸、苯丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸二钠盐二水合物和缬氨酸,它们都不是由活细胞天然产生的。
优选地,所述运输介质包括甘氨酸、盐酸精氨酸、丝氨酸和酪氨酸二钠盐二水合物(水合),用于刺激生长并延长细胞活性。
优选地,所述运输介质包括氯化胆碱、D-泛酸钙、叶酸、烟酰胺、盐酸吡哆醇、核黄素、盐酸硫胺素、肌醇,用于细胞生长和增殖。
优选地,所述运输培养基包括氯化钙(脱水)、硝酸铁(水合)、硫酸镁(脱水)、氯化钾、碳酸氢钠、氯化钠和磷酸钠(单碱),用于调节细胞渗透平衡和膜电位。
优选地,所述运输介质包括右旋葡萄糖作为细胞的主要能量来源。
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