[发明专利]一种高价值用材树种香合欢组培快繁方法

权利要求书

1.一种高价值用材树种香合欢组培快繁方法，其特征在于，包括以下步骤：

A.优株选择：选择经审定的香合欢良种或天然群落中干形通直、生长茂盛、健康无病虫害的香合欢植株为优良单株；

B.外植体选取及处理：对选出的优株进行伐桩或环割，萌芽后采集当年生带有腋芽或顶芽、长度为3～6cm的嫩枝作为外植体，剪去大部分叶片，用清水冲洗干净，再用去磷洗衣粉浸泡5～15min，然后用软毛刷刷洗外植体，再用清水冲洗0.5～1.2h；在超净台上用浓度为75％的酒精浸泡10～20s，再用无菌水冲洗1～3次，将其放入浓度为0.1％的HgCl₂溶液中浸泡15～20min，浸泡的过程中用玻璃棒不断搅拌，再用无菌水冲洗4～6次，用灭过菌的吸水纸吸干水分，备用；

C.初代诱导：取吸干水分的外植体，在无菌条件下，将切口部分剪掉后，插入初代诱导培养基，暗培养5～10天，然后在温度为20～26℃、光照强度1500～2500Lx、光照时间10～12h/d下继续培养5～10天，获取初始芽；

D.继代增殖培养：取芽高为1～5cm的初始芽，在超净台上接入继代增殖培养基，将芽体部分压入培养基中，芽与芽之间不接触，连续培养10-20天，获取继代丛芽；芽高不足1cm的初始芽及减掉初始芽之后的愈伤组织在无菌条件下接入初代诱导培养基继续诱导培养，待长到1cm以上时，再接入继代增殖培养基，进行继代增殖培养；

E.生根培养：对继代丛芽进行筛选，选取生长健壮、芽高为2～5cm的单芽，在无菌条件下接种到生根培养基中，进行生根培养，培养15～20天，获取生长健壮的组培生根苗；

F.炼苗移栽及苗木出圃：选取根数3条以上、根长达到1cm以上、生长健壮的组培生根苗，移到室外育苗大棚进行炼苗3～7天，之后用清水洗掉根部培养基，移栽入育苗容器中，淋透水；待组培苗苗高达到30cm以上时，生长健壮、无病虫害的苗木可出圃造林；

所述的步骤C中的初代诱导培养基由包括以下重量份的原料制备而成：改良MS3～5份、6-BA 0.0002～0.0005份、白糖25～35份、琼脂3～5份；

所述的步骤D中的继代增殖培养基由包括以下重量份的原料制备而成：改良MS3～5份、核黄素0.01～0.02份、抗坏血酸0.005～0.015份、2-iP 0.0015～0.003份、NAA 0.0004～0.0008份、赤霉酸0.0001～0.0005份、水解蛋白0.1～0.5份、白糖25～35份、琼脂3～5份；

所述的步骤E中的生根培养基由包括以下重量份的原料制备而成：改良MS 1～3份、核黄素0.01～0.02份、IBA 0.0004～0.0008份、GRR 0.0008～0.0015份、GA3 0.0001～0.0005份、白糖25～35份、琼脂3～5份；

所述的改良MS由包括以下重量份的原料制备而成：Na₂SeO₃ 0.1～1份、Ce(NH₄)₂(NO₃)₆0.5～1.5份、NH₄NO₃ 1000～1500份、KNO₃ 1000～2000份、MgSO₄·7H₂O 200～600份、CaCl₂·2H₂O 400～500份、Ca(NO₃)₂·4H₂O 200～300份、KH₂PO₃ 150～200份、K₂SO₄ 100～200份、H₃BO₃ 6～7份、MnSO₄·4H₂O 20～25份、CuSO₄·5H₂O 0.02～0.03份、ZnSO₄·7H₂O 5～10份、CoCl₂·6H₂O 0.02～0.03份、Na₂MoO₄·2H₂O 0.2～0.7份、KI 0.5～1份、FeSO₄·7H₂O 25～30份、EDTA-2Na 30～40份、盐酸硫胺素0.05～0.15份、烟酸0.2～0.7份、甘氨酸1～3份、肌醇50～150份。