[发明专利]巨噬细胞极化调节剂及其在促进血小板生成中的应用

说明书

本发明主要涉及巨噬细胞极化调节剂及其在促进血小板生成中的应用。具体地说，本发明涉及一种用于治疗受试者中的血小板减少性疾病的药物组合物，其包含巨噬细胞极化调节剂以及药学可接受的载体。本发明还涉及一种用于诊断受试者中的血小板减少性疾病的试剂盒，其包括用于检测血小板减少性疾病标志物的检测试剂和/或用于检测巨噬细胞极化水平的检测试剂。本发明还涉及巨噬细胞极化调节剂、用于检测所述标志物的检测试剂和用于检测巨噬细胞极化水平的检测试剂在血小板减少性疾病中的应用。本发明对疾病的分层诊断和对疾病的精准靶向治疗具有重要的临床意义。

技术领域

本发明涉及生物医学技术领域，具体地说，本发明主要涉及巨噬细胞极化调节剂及其在促进血小板生成中的应用。

技术背景

血小板减少性疾病也叫血小板减少症，是以外周血液中血小板数量异常减少为症状的疾病。病因包括血小板生成不足、血小板破坏过多或者血小板分布异常等。其中，移植后血小板延迟植入(PT)是一种常见的血小板减少性疾病。

移植后血小板延迟植入是异基因造血干细胞移植的严重并发症之一，是指在完全供者嵌合的前提下，移植后+60天白细胞和血红蛋白都已达到稳定植入，而血小板持续低于20×10⁹/L或仍然依赖血小板输注。

目前移植后PT的发病机制不清，尚无有效的临床治疗手段。移植后PT患者等血小板减少性疾病以巨核细胞成熟障碍和血小板减少为特征，导致相关死亡率增高及患者医疗费用增高。因此，促进移植后PT等血小板减少性疾病患者巨核细胞分化和血小板生成的新靶点的发现及新方案的研发是亟待解决的重要临床科学问题。

巨核细胞成熟到血小板生成是一个复杂的生物学过程。造血干细胞发育成巨核细胞在骨髓微环境从骨内膜迁移到血管微环境过程中受到骨髓微环境多种信号调控。任何导致巨核细胞生成及成熟障碍均会影响血小板生成。

近年来，动物研究提示，巨噬细胞作为骨髓免疫微环境重要组分，在维持造血干细胞稳定中发挥重要调控作用。但是，骨髓巨噬细胞对骨髓巨核细胞调控作用相关报道有限且不一致。有学者通过电镜观察发现，骨髓巨噬细胞与巨核细胞存在两细胞间的直接接触，认为巨噬细胞通过直接接触及物质传递发挥支持巨核细胞成熟及向血小板生成的作用。与之相反，有学者利用特发性血小板减少性紫癜小鼠模型发现，特异性消除小鼠骨髓巨噬细胞后有利于骨髓巨核细胞的成熟及分化，促进特发性血小板减少性紫癜小鼠外周循环中的血小板恢复。因此，尚需更多的研究明确骨髓巨噬细胞对巨核细胞的作用。

巨噬细胞是由骨髓单核细胞分化成熟而来。单核巨噬细胞系统是体内固有免疫重要组分，具有极强的异质性。单核细胞根据其表型及功能不同主要分为三个亚型：经典型、中间型和非经典型。巨噬细胞受环境刺激也会极化成不同表型和功能的细胞亚群，主要是经典激活型巨噬细胞(M1)和选择激活型巨噬细胞(M2)。这两类细胞表型及功能迥异，M1/M2极化失衡参与多种自身免疫学疾病、代谢性及炎症性疾病。功能上，M1可高表达促炎因子，具有强大的抗微生物和抗肿瘤活性，并介导活性氧诱导的组织损伤，抑制组织再生及愈合；M2表达抗炎因子，具有强大的吞噬能力，可清除碎片及凋亡细胞，促进组织修复及愈合，并具有促血管生成和促纤维化的特性。巨噬细胞在不同的组织微环境中，在不同的信号转导通路下进行着不同程度及方向的极化转变。目前报道介导巨噬细胞向M2极化的主要信号通路包括：①STAT6/IRF4/PPAR信号通路：IL-4通过与膜上的IL-4R集合，激活胞内STAT6磷酸化形成二聚体，磷酸化的STAT6进一步与KLF-4、PPAR-γ结合，启动基因转录调控M2型MФs特异的目的基因Arg-1、Mcr-1和Chil3等表达，促进M2方向的极化；②PI3K/AKT信号通路：基因敲除小鼠证实敲除Akt1基因可引起巨噬细胞向M1极化，酪氨酸磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase，PI3K)可催化下游Akt1促进巨噬细胞向M2极化。目前已证实多种肿瘤中存在PI3K/Akt信号通路的活化，对肿瘤细胞的存活、生长、转移、血管生成和代谢具有重要作用，因此大量的PI3K抑制剂已进入Ⅱ期、Ⅲ期临床试验并取得良好结果。