[发明专利]一种新型冠状病毒鼠适应株SARS-CoV-2/WBP-1及应用

说明书

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种新型冠状病毒鼠适应株SARS‑CoV‑2/WBP‑1及应用，所述的鼠适应株的保藏编号为CCTCC NO:V202031。该毒株在普通小鼠体内能够有效复制，并引发严重急性呼吸综合征的症状，包括引起小鼠死亡，体重极度下降，肺功能损伤，弥补了现有技术的不足，为疫苗研制、抗病毒药物研发、病毒感染机制和机体免疫反应等研究提供了有力的动物模型。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种新型冠状病毒鼠适应株SARS-CoV-2/WBP-1及应用。

背景技术

严重急性呼吸综合征冠状病毒2型(severe acute respiratory syndromecoronavirus 2,SARS-CoV-2)简称新型冠状病毒。目前关于新冠肺炎的研究主要集中在病毒流行病学调查、病毒检测方法、临床分离毒株序列比对和分析等方面，关于新型冠状病毒的入侵、复制、致病机制、免疫调控机制及抗病毒等研究还处于探索阶段。许多国内外学者推测新冠病毒或将类似于流感病毒，与人类长期共存。已有的研究报道和数据表明SARS-CoV-2的致死率远高于流感，然而到目前为止还没有专门针对新型冠状病毒治疗和预防的制剂或疫苗可以使用，因此亟需找到针对SARS-CoV-2的有效预防和治疗方法。研制新型冠状病毒疫苗及药物，有效控制新冠肺炎疫情，是摆在全世界科研工作者面前的一个重大使命，但目前新冠疫苗和药物研究中存在的一个难题就是缺少临床试验前的动物评价模型，包括对疫苗和药物安全性和有效性等的评估。

根据已有的文献报道，用于研究病毒发病机制的小动物模型如小鼠、仓鼠和豚鼠等对SARS类冠状病毒具有天然抗性，动物感染后不致病，冠状病毒诱发的严重呼吸系统疾病模型一直难以获得。目前主要使用人类血管紧张素转换酶2(hACE2)转基因小鼠进行药物和疫苗效果的动物评价，虽然hACE2转基因小鼠表现出一定的症状，但症状轻微、不致死，而且hACE2转基因小鼠价格昂贵，不易获得。因此，亟需一株对普通小鼠具有高致病性的新型冠状病毒毒株。SARS-CoV-2小鼠适应性毒株能够加快疫苗研制、抗病毒药物研发以及致病机理等研究。SARS-CoV-2动物模型构建对于评估抗病毒治疗和疫苗效果以及了解COVID-19的发病机制具有重要意义。但是关于能够有效感染小鼠产生适应性突变的新冠病毒毒株目前还未见报道。

发明内容

本发明的一个目的在于提供了一种新型冠状病毒鼠适应株SARS-CoV-2/WBP-1，所述的病毒的保藏编号为CCTCC NO:V202031。

本发明的另一个目的是提供一种新型冠状病毒鼠适应株SARS-CoV-2/WBP-1的应用。

为了达到上述目的，本发明采用以下技术措施：

一种新型冠状病毒鼠适应株SARS-CoV-2/WBP-1，将人源新型冠状病毒毒株感染小鼠，获得肺脏组织病毒匀浆液，将获得的组织病毒液再次感染小鼠，直至小鼠出现因病毒感染而死亡，从感染死亡小鼠体内分离病毒，进行RT-PCR检测和病毒空斑纯化；最终获得了对小鼠稳定致死的鼠适应株WBP-1，该毒株已于2020年8月17日送至中国典型培养物保藏中心(CCTCC)保藏，分类命名：新型冠状病毒SARS-CoV-2/WBP-1，保藏编号为CCTCC NO：V202031，地址：中国武汉武汉大学。将纯化获得的SARS-CoV-2/WBP-1鼠适应毒株进行全基因组测序，其序列为SEQ ID NO.1所示。该毒株本发明简称为WBP-1或鼠适应株WBP-1。

WBP-1鼠适应株可以在VERO细胞中增值并产生细胞病变。WBP-1在VERO细胞上增殖时，感染病毒后，37℃5％CO2恒温培养箱培养48-72h，80％以上细胞出现病变。

一种新型冠状病毒鼠适应株SARS-CoV-2/WBP-1的应用，包括：

1)利用该毒株制备成新型冠状病毒鼠模型，包括利用本领域的常规方式将该病毒感染鼠，以获得患病动物模型；