[发明专利]一种培养基介导交联的透明质酸基双交联水凝胶制备方法

权利要求书

1.一种培养基介导交联的透明质酸基双交联水凝胶制备方法，其特征在于：首先，将透明质酸进行改性，获得接有乙烯基和苯硼酸的改性透明质酸；然后将改性透明质酸溶解于DMEM中，并加入光引发剂后用紫外光照射引发反应，得到透明质酸基双交联水凝胶；其中，苯硼酸和透明质酸的邻二醇结构能够在DMEM的介导下自发形成苯硼酸酯，赋予水凝胶可注射性和粘附性，产生单交联透明质酸基水凝胶，而在加入光引发剂后用紫外光照射后，双键之间会发生光交联反应，形成第二重交联，增强水凝胶的力学性能，获得透明质酸基双交联水凝胶；其包括以下步骤：

1)将透明质酸溶于去离子水中，用氢氧化钠调节溶液pH至8.0，再加入甲基丙烯酸酐，在之后的1～4小时不断用氢氧化钠调节pH维持在8.0到8.5之间，而后室温下反应12～24h，反应结束后经透析冻干，获得乙烯基改性的透明质酸；将获得的乙烯基改性的透明质酸溶于吗啉乙磺酸缓冲液中，利用羧基活化剂4-(4,6-二甲氧基三嗪-2-基)-4-甲基吗啉盐酸盐活化透明质酸分子链上的羧基，加入3-氨基苯硼酸反应12～24h，反应结束后经透析冻干，获得接有乙烯基和苯硼酸的改性透明质酸；

2)将步骤1)得到的改性透明质酸溶解于DMEM中，即可得到单交联透明质酸基水凝胶，在单交联透明质酸基水凝胶中加入光引发剂I2959，搅拌充分混合均匀，在紫外光照射下反应交联得到透明质酸基双交联水凝胶。

2.根据权利要求1所述的一种培养基介导交联的透明质酸基双交联水凝胶制备方法，其特征在于：在步骤1)中，所述氢氧化钠的浓度为1mol/L。

3.根据权利要求1所述的一种培养基介导交联的透明质酸基双交联水凝胶制备方法，其特征在于：在步骤1)中，所述透明质酸和甲基丙烯酸酐的摩尔比为1:5～10。

4.根据权利要求1所述的一种培养基介导交联的透明质酸基双交联水凝胶制备方法，其特征在于：在步骤1)中，所述乙烯基改性的透明质酸、羧基活化剂4-(4,6-二甲氧基三嗪-2-基)-4-甲基吗啉盐酸盐和3-氨基苯硼酸的摩尔比为1:1～2:0.25～1。

5.根据权利要求1所述的一种培养基介导交联的透明质酸基双交联水凝胶制备方法，其特征在于：在步骤1)中，所述透析是指使用截留分子量为8000～14000的透析袋进行透析，透析时间为3～5天。

6.根据权利要求1所述的一种培养基介导交联的透明质酸基双交联水凝胶制备方法，其特征在于：在步骤2)中，所述改性透明质酸的质量浓度为1～3％。

7.根据权利要求1所述的一种培养基介导交联的透明质酸基双交联水凝胶制备方法，其特征在于：在步骤2)中，所述光引发剂I2959的质量分数为千分之5～10。