[发明专利]3D细胞侵袭转移测定装置在审
申请号: | 202010892752.9 | 申请日: | 2020-08-31 |
公开(公告)号: | CN111909847A | 公开(公告)日: | 2020-11-10 |
发明(设计)人: | 崔艳成;叶颖江;申占龙;姜可伟;王杉;周宇石;张萌萌;沈凯;郭鹏 | 申请(专利权)人: | 北京大学人民医院 |
主分类号: | C12M3/00 | 分类号: | C12M3/00;C12M1/34 |
代理公司: | 郑州豫开专利代理事务所(普通合伙) 41131 | 代理人: | 朱俊峰 |
地址: | 100032 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 细胞 侵袭 转移 测定 装置 | ||
3D细胞侵袭转移测定装置,包括盒盖、测定盒和四个玻片插盒,测定盒为圆筒形结构,测定盒内底部中心固定有基质胶注入块,基质胶注入块外形为长方体结构,基质胶注入块的四个棱边与测定盒的内壁之间固定有隔板,四块隔板将测定盒内壁与基质胶注入块外壁之间的内腔分割成四个细胞溶液仓;综上所述,本发明使用基质胶注入块注入基质胶,基质胶注入块的四个基质胶溶液腔为相互独立,互不相通,防止不同细胞因子交叉影响;本发明使用方便,可以同时测定多个不同细胞培养液中细胞因子对侵袭转移的影响,方便对基质胶内细胞进行取材,方便定时观察,防止相互影响。
技术领域
本发明涉及一种3D细胞侵袭转移测定装置。
背景技术
肿瘤侵袭是指肿瘤细胞从其起源部位沿组织间隙向周围组织浸润的过程,其标志是肿瘤细胞突破基底膜。肿瘤侵袭是肿瘤细胞、周围间质相互作用的结果,是肿瘤扩散的第一步。肿瘤转移是恶性肿瘤细胞从原发部位侵入淋巴管、血管或体腔,迁移到新的位置并在新环境中生成新的或继发性肿瘤的过程。与细胞系的平面生长方式(2D)不同,3D细胞生长状态呈立体形态,包括细胞微球(spheroid)和类器官(organoid)等。 3D细胞与人体细胞细胞生长方式更为接近,因此更能反映肿瘤细胞的体内状态。
为了研究肿瘤细胞侵袭转移的机制和研发抑制侵袭转移的药物,我们一直使用体外细胞培养来模拟活生物体的环境。2D细胞在平面上生长,与活生物体细胞生长方式有巨大差异。3D细胞培养是一种新型的细胞培养方法,3D细胞培养模型可以更准确地表示活生物体中的细胞所经历的自然环境。因此体外模拟肿瘤细胞的侵袭转移具有重要的意义。
侵袭转移是肿瘤细胞的重要特征,也是肿瘤导致患者死亡的主要原因。3D细胞侵袭转移实验主要用于体外模拟肿瘤细胞侵袭转移这种生物学行为。3D细胞侵袭转移实验对于研究肿瘤的发展机制、肿瘤药物筛查具有重要作用。首先3D细胞侵袭转移实验可以用于研究肿瘤与周围间质(成纤维细胞、免疫细胞等)的相互作用;第二,3D细胞侵袭转移可以用于研究肿瘤细胞发生发展过程中的具体机制;第三,3D细胞侵袭转移可以用于研发抑制侵袭转移的药物,体外实验是药物研发的重要步骤,可以极大的促进肿瘤药物研究。
目前2D培养细胞使用Transwell的方法来检测细胞的侵袭和转移;3D培养细胞检测侵袭转移的方法很少,Trevigen公司(Cultrex® 3D Spheroid Cell Invasion Assay)的检测方法并没有特殊的检测试剂盒,而是在96孔板中直接加入细胞外基质(相当于基质胶),然后在培养液中加入荧光以此标记细胞,通过特殊仪器来观察细胞形态变化,最终需要检测软件来测算结果;这种检测方法设计较简单,需要加入荧光来标记细胞,加入荧光可能对细胞造成损害而影响实验结果,并且此方法需要特殊仪器来追踪荧光标记的细胞,提高了检测成本;另外,此方法目前尚无法检测细胞与细胞之间的相互作用。
发明内容
本发明为了解决现有技术中的不足之处,提供一种能够多通路研究细胞侵袭转移、且互不影响的3D细胞侵袭转移测定装置。
为解决上述技术问题,本发明采用如下技术方案:3D细胞侵袭转移测定装置,包括盒盖、测定盒和四个玻片插盒,测定盒为圆筒形结构,测定盒内底部中心固定有基质胶注入块,基质胶注入块外形为长方体结构,基质胶注入块的四个棱边与测定盒的内壁之间固定有隔板,四块隔板将测定盒内壁与基质胶注入块外壁之间的内腔分割成四个细胞溶液仓;
基质胶注入块的中部开设有方形孔,基质胶注入块的方形孔内固定有隔开件,隔开件的截面为十字型,隔开件将基质胶注入块的方形孔分割成四个相互独立的基质胶溶液腔,四个基质胶溶液腔对应于四个细胞溶液仓,每个细胞溶液仓均通过一个转移通道与对应的基质胶溶液腔连通,所述转移通道开设在基质胶注入块的下部;
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