[发明专利]一种免疫抑制药物及中亚苦蒿提取物在制备治疗自身免疫相关疾病的药物中的应用

说明书

本发明提供了一种免疫抑制药物及中亚苦蒿提取物在制备治疗自身免疫相关疾病的药物中的应用，属于医药技术领域。免疫抑制药物以中亚苦蒿提取物(AEM‑SC)为活性成分，该提取物是将中亚苦蒿的醇提物经大孔吸附树脂分离后收集的70％乙醇洗脱组分，再经硅胶柱分离得到的洗脱组分。AEM‑SC在体外与体内实验中，均表现出抑制树突状细胞成熟的能力，显示AEM‑SC有一定的免疫抑制作用。因此，中亚苦蒿提取物作为免疫抑制物在制备治疗自身免疫相关疾病的药物中应用，为筛选安全、高效的免疫抑制剂提供候选材料。

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种免疫抑制药物及中亚苦蒿提取物在制备治疗自身免疫相关疾病的药物中的应用。

背景技术

树突状细胞(Dendritic cell，DC)是功能强大的抗原呈递细胞，机体免疫反应的驱动者，可调节各种效应细胞的功能。DC激活的特征包括趋化因子受体(如CCR7)、粘附分子、共刺激分子(CD54、CD80和CD86)、MHC I和II分子等的上调，这些对于其迁移至淋巴组织及激活免疫反应答是必需的。成熟的DC能够激发免疫应答，同时也会打破机体免疫耐受，导致自身免疫疾病的发生。现如今，DC已成为自身免疫性疾病治疗的研究热点。大量研究表明，中草药可以促进DC的成熟来增强免疫反应，或抑制DC的成熟来抑制炎症或自身免疫性疾病的免疫反应。如甘草多糖可激活RAW264.7细胞，且能与HPV-DC疫苗联用，在TC-1肿瘤小鼠模型中诱导HPV特异性细胞应答并抑制肿瘤生长；阿魏菇水提物可上调DC表面CD40、CD80、CD86和MHC II的表达，也增加了IL-12的产生；刺山柑果实总生物碱粗提物可抑制LPS诱导的DC成熟。中草药可有效预防和治疗多种免疫疾病，是新型耐受佐剂的来源。

蒿属(Artemisia L.)植物因其具有生化和药理学功能的多样性，受到越来越多的关注。蒿属中的中亚苦蒿(Artemisia absinthium L.)，为菊科蒿属的多年生草本植物，其全草入药，味苦、性寒，药用部位是叶和茎。中亚苦蒿具有抗感染、抗癌、驱风、镇痛等作用，可用于治疗关节肿痛、肿瘤、急性细菌性痢疾等疾病。中亚苦蒿主要有萜类衍生物、挥发油、黄酮类、酚类、木脂素及其他类化合物等成分。现有技术报道的中亚苦蒿提取物应用于化妆品、护肤品里，主要发挥皮肤调理剂的作用。此外，中亚苦蒿的醇提物及石油醚、乙酸乙酯萃取物通过活性氧产生诱导内质网应激及线粒体依赖性途径导致肝癌细胞的凋亡，抑制肝癌细胞生长，因此中亚苦蒿提取物在制备抗肝癌药物中的应用。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种新的免疫抑制药物，是以新的中亚苦蒿提取物为活性成分，能够抑制LPS诱导的DC成熟及炎症细胞因子表达，为筛选安全、高效的免疫抑制剂提供候选材料。

本发明提供了一种免疫抑制药物，主要活性成分包括中亚苦蒿提取物；所述中亚苦蒿提取物由以下步骤制备得到：

1)将中亚苦蒿地上部分的粉末和体积浓度80％～90％乙醇水溶液混合在55～65℃条件下提取，收集的提取液去除醇溶剂后得到醇提取物；

2)将所述醇提取物过AB-8大孔树脂柱，依次用水和体积浓度分别为30％、50％、70％、85％的乙醇水溶液以及纯乙醇进行梯度洗脱，每个梯度洗脱3个柱体积，收集体积浓度70％乙醇水溶液洗脱的组分，得到的乙醇洗脱组分，经硅胶柱层析分离，以系列梯度体积比的石油醚和乙酸乙酯的混合液进行洗脱，收集用体积比为1:10的石油醚和乙酸乙酯的混合液洗脱的组分，溶解于二甲基亚砜中，得到中亚苦蒿提取物。

优选的，步骤1)中亚苦蒿地上部分的粉末的质量和乙醇水溶液体积比为1:8～12；

所述提取的次数为2～4次。

优选的，步骤2)中硅胶柱层析分离后，依次按照石油醚和乙酸乙酯的体积比为10:1，9:1，8:1，7:1，6:1，5:1，4:1，3:1，2:1，1:1，1:2，1:3，1:4，1:5，1:6，1:7，1:8，1:9和1:10的混合液进行洗脱。