[发明专利]测定肌酐含量的试剂组合、试剂或试剂盒

说明书

本发明涉及生物技术领域，特别涉及测定肌酐含量的试剂组合、试剂或试剂盒。本发明提供的试剂组合包含试剂组1和试剂组2，所述试剂组1包含肌酸酶、肌氨酸氧化酶、抗坏血酸氧化酶、色原和过氧化氢酶，所述试剂组2包含肌酐酶、4‑氨基安替吡啉和过氧化物酶，其中，所述色原选自N‑(2‑羟基‑3‑磺丙基)‑3,5‑二甲氧基苯胺或其钠盐和N‑乙基‑N‑(2‑羟基‑3‑磺丙基)‑3‑5‑二甲氧基苯胺。本发明在测定的试剂中加入抑制剂，阻断测定过程中新肌酸和肌酐的生成，降低肌酐检测中由样品中存在的干扰。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别涉及测定肌酐含量的试剂组合、试剂或试剂盒。

背景技术

肌酐是一种低分子含氮化合物，分子量116000，主要由肌肉代谢产生。在肌肉中，肌酸主要通过不可逆的非酶脱水反应缓缓地形成肌酐，再释放到血液中，随尿排泄。在正常情况下，人体的肌酐含量基本保持稳定。血浆肌酐的正常上限值为100微摩尔/升左右。肌酐是小分子物质，可通过肾小球滤过，所以血清肌酐的浓度变化主要由肾小球的滤过能力来决定。滤过能力下降，则肌酐浓度升高。血肌酐值高出正常值多数意味肾脏受损，尿肌酐的含量高则可以反映肾过滤功能受损，因此肌酐的化验值能较准确的反应肾功能的情况。

肌酐是肌酸代谢的终产物。肌酸部分来自食物摄入，部分在体内生成，其合成原料是甘氨酸、精氨酸和蛋氨酸提供甲基。肌酸在肌酸激酶的催化下生成肌酸磷酸盐，后者不稳定，经脱水、脱磷酸生成肌酐。

目前医学临床测定血浆和尿肌酐主要采用酶催化法和化学测定法。

肌酐的酶学测定方法，主要有3种类型：①肌酐氨基水解酶法：肌酐酶-肌酸激酶-丙酮酸激酶-乳酸脱氢酶-还原型辅酶反应体系；②肌氨酸氧化酶法；肌酐酶-肌酸酶-肌氨酸氧化酶-过氧化物酶反应体系；③肌酐亚氨基水解酶)法；肌酐亚氨基水解酶—N-甲基乙内酰脲酰氨基水解酶—N氨基甲酰胺肌氨酸酰氨基水解酶—肌氨酸氧化酶—过氧化物酶反应体系。酶学方法虽成本较高，但方法特异性高，结果准确，适用于各种自动化分析仪，亦可用于干化学方法或电化学方法。

肌氨酸氧化酶法原理为：样品中的肌酐在肌酐酶的催化下水解生成肌酸。在肌酸酶的催化下肌酸水解生成肌氨酸和尿素。肌氨酸在肌氨酸氧化酶的催化下氧化成甘氨酸、甲醛和过氧化氢最后偶联Trinder反应，比色法测定。

第一反应：

存在于标本中的内源性肌酸被分解生成氧和水，避免对第二反应产生影响。

第二反应：

肌酐在各种酶的作用下生成红色的醌色素，醌色素的含量与样本中的肌酐成正比，从而计算出肌酐的含量。

一般测代谢物含量的方法中，不用动态考虑其动态的变化。把血清中肌酐和肌酸的浓度当成静态固定。但是在肌酐测定中，因为肌酐的含量很低，是一般小于110umol/L。在如此微量状态下，新生产的肌酸量很容易影响测定数据的准确度。因此，提供肌酐测定试剂具有重要的现实意义。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了测定肌酐含量的试剂组合、试剂或试剂盒。本发明提供的试剂用于体外定量测定人血清中肌酐的含量。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了测定肌酐含量的试剂组合，包括试剂组1和试剂组2；

其中，试剂组1包括肌酸酶、肌氨酸氧化酶、抗坏血酸氧化酶、色原、过氧化氢酶、生物酶稳定剂、抑制剂、防腐剂、表面活性剂；