[发明专利]一种CAR-T细胞的培养基及培养方法

权利要求书

1.一种CAR-T细胞的培养基，其特征在于：包括以下重量份原料：肌酸磷酸32～60份、焦磷酸12～34份、白细胞介素12～50份、碱性成纤维细胞生长因子10～40份、苯乙酸胍15～35份、巯基乙酸11～38份、角鲨烷8～15份、转铁蛋白2～9份；碱性成纤维细胞生长因子的浓度为10～25ng/mL。

2.如权利要求1所述的一种CAR-T细胞的培养基，其特征在于：包括以下重量份原料：肌酸磷酸45份、焦磷酸22份、白细胞介素35份、碱性成纤维细胞生长因子25份、苯乙酸胍25份、巯基乙酸24份、角鲨烷10份、转铁蛋白5份。

3.如权利要求1所述的一种CAR-T细胞的培养基的培养方法，其特征在于：包括以下步骤：

S1、收集脐带血，分离出CAR-T细胞，选取1～3mm³CAR-T细胞放置于离心管中，加入2～5mg/ml的胰酶EDTA浸润，然后加入DMEM完全培养基终止胰酶消化；

S2、将D-Hank’s平衡盐溶液加入S1中的离心管中，将离心管内的溶液离心4～8min，离心力为300～800g，离心速率为1500～2200r/min；

S3、将离心后的CAR-T细胞转移至权利要求1所述的培养基中，加入同等细胞数量的CD3/CD28抗体偶联磁珠刺激培养，放至培养箱中培养8～12天；所述培养箱的培养条件为：培养温度28～40℃，磁场频率为2～50Hz，磁场强度3～100mT。

4.如权利要求3所述的一种CAR-T细胞的培养基的培养方法，其特征在于：所述DMEM的添加量为2～5ml。