[发明专利]一种基于种群多态性从头驯化沙漠植物沙蓬的方法

权利要求书

1.一种基于种群多态性从头驯化沙漠植物沙蓬的方法，其特征在于：包括以下步骤：

步骤1、沙蓬居群样品采集地及区域划分：根据沙蓬野外的分布情况，按照经纬度、海拔、降水量、温度气候条件，选择多个地点的野生沙蓬居群，居群间间隔至少50km；取样点分布在中国西北地区和东北地区的干旱地区；根据地理位置，分为南部群组和北部群体；

步骤2、沙蓬种子采集：每个沙蓬居群随机选至少5株收集种子,任意两株之间间隔至少30m,共计26个居群，225个体；种子样品带回保存于4℃冷房；

步骤3、同质园场地选择：土壤基质为松散贫瘠的流沙,沙层稳定含水量为2％-3％；植被盖度为1％；

步骤4、播种及前期处理：在播种前,将不同采样点采集到225株植株的种子，按种子与沙子的比为1：3的比例混合，放在塑料瓶中打磨5分钟；

步骤5、同质园实验：根据步骤(1)划分的南北两个群组，然后按照50cm的株距，70cm的行距在土地上铺塑料膜上播种，种子播种深度1cm，点种时，用两个手指戳开塑料膜，塑料膜开口2×2cm²，播种深度1cm；

步骤6、苗期灌溉：移栽之后每个样方附近均安装滴灌系统补充灌溉，消除种子收集的原生地与本实验种植所在水分差异；在苗期20天进行一次浅灌，生长后期再进行灌溉或者浅灌；

步骤7、表型测量：当籽粒饱满，植物叶片发黄时，认为种子已经成熟后，进行沙蓬植株高度、茎直径和基部分枝长、地上生物量，千粒重，种子粒径实测；

步骤8、对沙蓬植株高度、茎直径、基部分枝长、地上生物量、收获种子重量和种子粒径分别进行群组统计；

步骤9、气象数据收集转化：从WorldClim数据库下载1950-2000年的气候资料，以内插值替换成分辨率为30弧秒分辨率的栅格几率；

步骤10、气象数据下载；

步骤11、可遗传优异表型筛选；

步骤12、沙蓬驯化自然条件筛选；

步骤13、多代驯化法固定沙蓬优质的遗传性状；

步骤14、优质种质资源的群体遗传评价。

2.根据权利要求1所述的一种基于种群多态性从头驯化沙漠植物沙蓬的方法，其特征在于：所述步骤(7)中，具体包括以下步骤：

步骤a、植株高度：其中植株高度以收拢状态和自然状态两种状态下用钢卷尺进行测量；

步骤b、茎直径：以游标卡尺，测量沙蓬地上10cm高处的茎的直径；

步骤c、基部分枝长：以主茎干基部开始，到分支枝末梢，作为基部枝长；

步骤d、地上生物量：根据沙蓬根系的颜色，减除植株的根，用感量为0.01的电子天平称取沙蓬地上生物量，单位用克计算；

步骤e、千粒重：人工用直径为2.0,1.0,0.5,0.125,0.1mm的筛子将沙蓬种子分级处理干净后，用天平秤取收获种子重量；千粒重以直径1.0mm筛子上面的饱满颗粒，先测量百粒重，然后根据平均值法，计算出千粒重；

步骤f、种子粒径：随机选择10粒完整沙蓬种子,均匀置于标准方格纸上,使用数码照相机拍照，用photoshop10.0测量种子的粒径。

3.根据权利要求1所述的一种基于种群多态性从头驯化沙漠植物沙蓬的方法，其特征在于：所述步骤(13)中，根据步骤(7-12)筛选出优异性状，选取东北沙地和西北沙漠任意三个代表群体，等比例混合成种子池，连续耕作4年；选择种子大小性状完全稳定，种子大小超过18目的种子，作为种质资源；试验田的种植及操作遵循步骤(1-8)的方法进行。

4.根据权利要求1所述的一种基于种群多态性从头驯化沙漠植物沙蓬的方法，其特征在于：所述步骤(14)中，将步骤(13)选育的种质资源进行遗传多样性评价，具体包括：

先将种子按照步骤(4)进行播种；

其次随机采集苗期的每个群体的15-20个个体的叶片样本，分两个批次作为重复取样；

利用ITS和五个叶绿体DNA片段：ndhC/trnV,petB/petD,rbcL,rpoB/trnC和trnS1/trnG1进行扩增测序。