[发明专利]用于2019新型冠状病毒核酸提取的组合物、试剂盒、用途及其方法有效
申请号: | 202010897178.6 | 申请日: | 2020-08-31 |
公开(公告)号: | CN111808852B | 公开(公告)日: | 2020-12-11 |
发明(设计)人: | 吴康;龙凤英;缪为民;戴立忠 | 申请(专利权)人: | 圣湘生物科技股份有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C12Q1/6806;C12Q1/70;C12Q1/6851;C12R1/93 |
代理公司: | 北京派特恩知识产权代理有限公司 11270 | 代理人: | 黄景辉;张颖玲 |
地址: | 410205 湖南省长沙*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 2019 新型 冠状病毒 核酸 提取 组合 试剂盒 用途 及其 方法 | ||
1.一种提取2019新型冠状病毒核酸的组合物,所述组合物包括:
提取溶液1:盐酸胍、硫氰酸胍、尿素、莎梵婷、氯化钾、氯化锂、十二烷基硫酸三乙醇胺、NP-40、曲拉通X-100,和异丙醇;
提取溶液2:Tris-HCl、氯化锂、醋酸钠、十二烷基硫酸三乙醇胺、NP-40、SDS,和乙醇;以及
提取溶液3:Tris-HCl、氯化钠,和乙醇;
其中,所述提取溶液1盐酸胍的浓度为1~3mol/L;硫氰酸胍的浓度为0.5~1.5mol/L;尿素的浓度为0.5~1.5mol/L;莎梵婷的浓度为0.01~0.5mmol/L;氯化钾的浓度为100~200mmol/L;氯化锂的浓度为0.2~1mol/L;十二烷基硫酸三乙醇胺的质量/体积比为0.1%~1%;NP-40的质量/体积比为0.1%~1%;曲拉通X-100的质量/体积比为0.01%~1%;异丙醇的体积/体积比为30%~50%;
其中,所述提取溶液2中Tris-HCl的浓度为5~15mmol/L;氯化锂的浓度为50~200mmol/;醋酸钠的浓度为50~200mmol/L;十二烷基硫酸三乙醇胺的质量/体积比为0.1%~1%;NP-40的质量/体积比为0.1%~1%;SDS的质量/体积比为1%~5%;乙醇的体积/体积比为10%~30%;
其中,所述提取溶液3中Tris-HCl的浓度为5~15mmol/L;氯化钠的浓度为10~30mmol/L;乙醇的体积/体积比为60%~80%。
2.根据权利要求1所述的组合物,其中,所述组合物还包括磁珠、洗脱液和蛋白酶K中的至少一种或多种。
3.一种用于提取2019新型冠状病毒核酸的试剂盒,所述试剂盒包括如权利要求1或2所述的组合物。
4.一种用于检测2019新型冠状病毒的试剂盒,所述试剂盒包括如权利要求1或2所述的组合物。
5.根据权利要求4所述试剂盒,其中,所述试剂盒还包括用于检测2019新型冠状病毒的引物和探针。
6.权利要求1或2所述的组合物在制备用于检测2019新型冠状病毒的试剂盒中的用途。
7.一种以非诊断目的检测2019新型冠状病毒的方法,所述方法包括以下步骤:
1)使用如权利要求1或2中任一项所述的组合物提取并纯化待测样本的核酸;
2)使用对步骤1)获得的核酸进行荧光定量PCR;
3)获得并分析结果。
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