[发明专利]非人灵长类动物胃饥饿素的检测方法

权利要求书

1.一种非人灵长类动物胃饥饿素的检测方法，其特征在于经过下列步骤：

（1）将经过动物训练的非人灵长类动物在晚餐后通宵禁食，并于早餐前按常规采集血样；

（2）将步骤（1）采集的血样在30s内使用对羟基汞苯甲酸钠作为抑制剂进行处理，即向血样中加入对羟基汞苯甲酸钠，10ul/ml血样，然后颠倒采血管数次，混匀；

（3）将步骤（2）所得处理后的血样以3500g以上4℃离心10min，得到待测血浆，然后将血浆分装成数管，冻存于-80℃直至检测；

（4）根据双抗夹心ELISA原理建立操作步骤：

a、将试剂盒和待测血浆在室温下静置30分钟；

b、清洗试剂盒中的酶标板板孔；

c、加样：分配标准品、质控品、待测血浆样品；

d、孵育：每孔加入AChE标记物，空白对照孔除外；用封板膜封板，放摇床轻柔振荡使样品混匀，再放室温静置孵育；

e、洗涤：使用洗板机清洗数次酶标板后，在吸水纸上拍干；

f、显色：每孔加入Ellman试剂，放至摇床上（避光），室温孵育；

g、读板：使用酶标仪读取OD值；

（5）根据标准品的OD值及已知浓度绘制标准曲线，最终根据待测血浆样品的OD值来测算出胃饥饿素的浓度。

2.根据权利要求1所述的非人灵长类动物胃饥饿素的检测方法，其特征在于：所述步骤d的室温静置孵育是孵育温度为25℃，孵育时长为3小时。