[发明专利]一种检测吡唑醚菌酯的试纸条及方法有效

专利信息
申请号: 202010903491.6 申请日: 2020-09-01
公开(公告)号: CN112114147B 公开(公告)日: 2023-01-20
发明(设计)人: 王兆芹;马玉华;万宇平;何方洋;王琳琛;赵正苗;崔海峰 申请(专利权)人: 北京望尔生物技术有限公司
主分类号: G01N33/577 分类号: G01N33/577;G01N33/558;G01N33/543;G01N33/53;G01N33/52
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地址: 102206 北京市昌平*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 一种 检测 吡唑 醚菌酯 试纸 方法
【权利要求书】:

1.一种检测吡唑醚菌酯的试纸条,包括样品吸收垫、结合物释放垫、反应膜、吸水垫和底板,所述反应膜上具有包被有吡唑醚菌酯半抗原-载体蛋白偶联物的检测线和包被有羊抗鼠抗抗体的质控线,所述结合物释放垫上喷涂有吡唑醚菌酯单克隆抗体-胶体金标记物;所述吡唑醚菌酯单克隆抗体是以吡唑醚菌酯半抗原-载体蛋白偶联物作为免疫原制备获得;所述吡唑醚菌酯半抗原-载体蛋白偶联物由吡唑醚菌酯半抗原与载体蛋白偶联得到,所述载体蛋白为牛血清白蛋白、卵清蛋白、血蓝蛋白、甲状腺蛋白或人血清白蛋白,其特征在于所述吡唑醚菌酯半抗原的合成方法为:1)取4.0g甲基2-(溴甲基)-4-碘苯(甲氧基)氨基甲酸酯溶解于80mL N,N-二甲基甲酰胺中,加入1.12g KOH和1.94g 1-(4-氯苯基)-2H-吡唑啉-3-酮,充分搅拌后,加入0.33g无水碘化钾,油浴加热搅拌,80℃反应7h,停止反应,冷却至室温,加入100mL水和200mL乙酸乙酯,震荡,静置,分去水相,有机相加80mL纯水,震荡,静置,分去水相,有机相蒸干,得到中间体1;2)将全部的中间体1加100mL二甲基亚砜溶解,加入0.48g氢化钠、0.77g无水碘化亚铜和1.21g氨基丁酸,充分搅拌,100℃反应9h,停止反应,冷却到室温,加入200mL水,用6mol/L盐酸调节pH至5,加乙酸乙酯萃取3次,每次100mL,合并有机相,水洗,旋蒸浓缩,上硅胶柱,用石油醚和乙酸乙酯体积比为3:1的混合溶剂洗脱分离,得到吡唑醚菌酯半抗原,其分子结构式为:

2.如权利要求1所述的试纸条,其特征在于所述样品吸收垫、结合物释放垫、反应膜、吸水垫依次粘贴在底板上。

3.如权利要求1-2任一项所述的试纸条,其特征在于所述结合物释放垫1/3~1/2被覆盖于样品吸收垫下。

4.一种制备权利要求1-3任一项所述试纸条的方法,其包括步骤:

1)制备喷涂有吡唑醚菌酯单克隆抗体-胶体金标记物的结合物释放垫;

2)制备具有包被有吡唑醚菌酯半抗原-载体蛋白偶联物的检测线和包被有羊抗鼠抗抗体的质控线的反应膜;

3)将1)和2)制备好的结合物释放垫、反应膜与样品吸收垫、吸水垫和底板组装成试纸条。

5.一种检测果蔬样本中吡唑醚菌酯残留的方法,其包括步骤:

1)样品前处理;

2)用权利要求1-3任一项所述的试纸条进行检测;

3)分析检测结果。

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